PEG介導的動物細胞融合技術是什麼原理啊

2021-03-19 18:19:14 字數 1871 閱讀 1355

1樓:匿名使用者

細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)是指真核細胞通過介導和培養,兩個或多個細胞合併成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始於20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用範圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以融合, 種間遠緣細胞也能融合, 細胞與組織不同, 不排斥異類、異種細胞, 動物細胞如此,植物細胞也是如此。基因型相同的細胞融合成的雜交細胞稱為同核體(homokaryon);來自不同基因型的雜交細胞則稱為異核體(heterokaryon)。

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細胞融合原理

2樓:匿名使用者

當細胞置於非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括dna、rna、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法,電穿孔已被廣泛用於各種細胞型別,包括細菌、酵母、植物和動物細胞;而且,它還能作為注射方法(稱為電注射),把各種外源物質引入活細胞。

與其他常用的匯入外源物質的方法相比,電穿孔具有很多優點。首先,不必象顯微注射那樣使用玻璃針,不需要技術培訓和昂貴的裝置,可以一次對成百萬的細胞進行注射。第二,與用化學物質相比,電穿孔幾乎沒有生物或化學***。

第三,因為電穿孔是一種物理方法,較少依賴細胞型別,因而應用廣泛。實際上,對大多數細胞型別,用電穿孔法基因的轉移效率比化學方法高得多。

除了能使細胞膜具有通透性,讓外界的分子擴散入胞液中以外,高強度的電場脈衝也能引起細胞融合,這一現象叫做電融合。然而,在用電脈衝融合前必須使細胞相互緊密接觸,這一電融合方法在原生質融合製取雜交植物,胚胎細胞相互融合製備動物克隆方面非常有用,尤其在製取雜交瘤細胞製備單克隆抗體方面用處很大。幾個實驗室已證明使用電場電融合效率比常規的化學融合方法高10到100倍,最近,貼壁細胞的電融合還被用來研究細胞融合時細胞的骨架成分和細胞器的動力學重排。

動物細胞融合的原理

3樓:小雪

有:震動,病毒。

誘導細胞融合的方法有三種:生物方法(病毒)、化學方法(聚乙二醇peg)、物理方法(離心,震動,電刺激)。某些病毒如:

仙台病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介導病毒同宿主細胞融合,也可介導細胞與細胞的融合,因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合。化學和物理方法可造成膜脂分子排列的改變,去掉作用因素之後,質膜恢復原有的有序結構,在恢復過程中便可誘導相接觸的細胞發生融合。

培養基的差異:動物細胞的培養基是液體培養基、血清培養基,而植物培養基是固體培養基。

以下是動物培養基和植物培養基的具體內容:

動物培養基:

1.動物細胞培養液的成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。

動物細胞培養成功的關鍵在於培養液中是否含有動物血清,因為由於動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境,此外動物血清中也包含了一些動物的激素和酶,可以促進細胞的發育。

2.動物細胞培養液的特點:液體培養基、含動物血清。

植物培養基:

( 1 )愈傷組織誘導培養基: ms 培養基(蔗糖含量為 10 g/l , 2,4 – d 含量為 2 mg/l ,瓊脂 10 g/l )。

( 2 )試驗培養基:在 ms 培養基中加入 iaa 和 6–ba 。

吲哚乙酸(iaa)先用少量 0.1 mol/l naoh 溶解, 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/l hcl 溶解,然後用蒸餾水稀釋,再加入培養基中。

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