求助,流式細胞學檢測T細胞亞群和NK活性

2021-03-19 18:27:18 字數 2476 閱讀 5830

1樓:匿名使用者

流式細胞術(flow cytometry, fcm)是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細胞,並能同時從一個細胞中測得多個引數,與傳統的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點。

將待測細胞染色後製成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室,不含細胞的磷流式細胞術酸緩衝液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度,這樣,鞘液就能夠包繞著樣品高速流動,組成一個圓形的流束,待測細胞在鞘液的包被下單行排列,依次通過檢測區域。

流式細胞儀通常以鐳射作為發光源。經過聚焦整形後的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細胞在鐳射束的照射下,產生散射光和激發熒光。這兩種訊號同時被前向光電二極體和90°方向的光電倍增管接收。

光散射訊號在前向小角度進行檢測,這種訊號基本上反映了細胞體積的大小;熒光訊號的接受方向與鐳射束垂直,經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光訊號。

這些熒光訊號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度,經光電倍增管接收後可轉換為電訊號,再通過模/數轉換器,將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數字訊號。計算機把所測量到的各種訊號進行計算機處理,將分析結果顯示在計算機螢幕上,也可以列印出來,還可以資料檔案的形式儲存在硬碟上以備日後的查詢或進一步分析。

檢測資料的顯示視測量引數的不同由多種形式可供選擇。單引數資料以直方圖的形式表達,其x軸為測量強度,y軸為細胞數目。一般來說,流式細胞儀座標軸的解析度有512或1024通道數,這視其模數轉換器的解析度而定。

對於雙引數或多引數資料,既可以單獨顯示每個引數的直方圖,也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體檢視。

細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現的。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體,充電後振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測定細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷,當液滴流經帶有幾千伏特的偏轉板時,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,不予充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現細胞的分離。

流式細胞術檢測小鼠脾臟t細胞亞群結果怎麼分析

2樓:匿名使用者

簡單的概括:

1 先在fsc/ssc散點圖gate出淋巴細胞2 然後把淋巴細胞顯示到柱狀圖,gate出cd3陽性的(t細胞)3 再把t細胞顯示到散點圖,橫座標,縱座標分別為cd4和cd8

淋巴細胞亞群測定的臨床意義

3樓:劉嵐

1、淋巴細胞亞群的測定,主要用於瞭解惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者機體的免疫功能是否處於平衡狀態。某種細胞亞群所佔百分比過高或過低,都提示存在免疫功能紊亂,但一般情況下對疾病的診斷和鑑別無特異性。

2、cd3+cd4+細胞百分比和絕對數、cd4+細胞/cd8+細胞比值在獲得性免疫缺陷綜合症(aids)患者顯著下降,常作為該病診斷、病情觀察和預後判斷的重要指標。但應注意,cd4+細胞數和cd4/cd8比值的降低也見於一些惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷、器官移植後發生排斥反應以及應用免疫抑制劑**的患者。

3、用於白血病細胞免疫表型分析。在某些白血病,如t系急性淋巴細胞白血病細胞cd2、cd3、cd4、cd5、cd8特異性表達;b系急性淋巴細胞性白血病cd19、cd20、cd24陽性表達;慢性淋巴細胞性白血病細胞多表達cd5、cd19、cd20;毛細胞性白血病患者cd19、cd20、cd22呈陽性;nk細胞白血病細胞80%~90%cd16陽性,≥95%cd56陽性。

4、nk細胞測定的臨床意義:nk細胞活性下降見於大多數腫瘤患者,特別是中晚期或伴有轉移的癌症患者;某些白血病和白血病前期患者,nk細胞活性隨病情進展而逐漸降低,以急性期降低最為明顯,緩解期患者的nk細胞活性也仍低於正常健康對照;柯薩奇病毒、心肌炎病毒、流感病毒等感染性疾病nk細胞活性下降;某些細菌性和真菌**染疾病患者也見nk細胞活性低下;免疫缺陷症chediak-higashi綜合徵患者伴有先天性nk細胞缺陷;重症聯合免疫缺陷徵患者體內t細胞、b細胞、nk細胞的功能同時缺陷。nk細胞活性增高見於多發性骨髓瘤、肺結核等疾病。

4樓:匿名使用者

阿瓦身體禮物的時候我的

如何分析流式細胞儀檢測t淋巴細胞亞群結果

5樓:匿名使用者

稱為「胸腺依賴性淋巴細胞」胸腺衍生的淋巴細胞,簡稱為「t細胞」是鳥類和哺乳動物由胸腺衍生的淋巴細胞。分佈於胸腺依賴性區外周淋巴組織,並通過淋巴,血液和組織液再迴圈。為約70%在血液淋巴細胞,更長的壽命帳戶。

參與細胞的免疫反應,也可能會影響體液免疫。各自不同的免疫應答的功能,t細胞可以被分成幾個亞組:①輔助性t細胞;輔助t細胞和b細胞識別抗原的免疫應答; ②抑制性t細胞;抑制細胞免疫和體液免疫功能; ③效應t細胞;參與細胞免疫(dth),用淋巴細胞活素功能的釋放;殺傷t細胞殺傷靶細胞的功能。

b淋巴細胞(囊依賴性淋巴細胞)

也稱為b細胞。從骨髓的多能幹細胞。發展在家禽滑囊內產生,故稱為袋依賴性淋巴細胞/髓淋巴細胞稱為b細胞依賴性的,是從淋巴骨髓幹細胞分化。

如何分析流式細胞儀檢測t淋巴細胞亞群結果

最常見的是分析cd4,cd8亞群。先在fsc,ssc散點圖上劃出淋巴細胞gate。然後在此gate基礎上選取t細胞標誌染色陽性的細胞群 一般是cd3 在把cd34陽性的細胞根據cd4 和cd8染色情況形式為散點圖,得到cd4 cd8 cd4 cd8 以及雙陽性的比率。如果還有其他細胞標誌的染色,再進...

流式細胞術的作用原理,流式細胞術 細胞凋亡 和週期有什麼區別嗎?原理有什麼不一樣啊?

流式細胞術 flow cytometry,fcm 是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細胞,並能同時從一個細胞中測得多個引數,與傳統的熒光鏡檢查相比,具有速度快 精度高 準確性好等優點。將待測細胞染色後製成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動...

急求流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡的結果圖6張

你是要這些圖來偽造資料吧。我看還是老老實實的做實驗吧。細胞週期和凋亡用流式細胞儀做都很簡單,全部試驗1 2天就全部搞定了。做研究還是要誠實為大 這沒什麼好參考bai價值的啊,你做不du 同的細胞出來的zhi 差異很大的,我做過dao 心臟和肝臟的,就內差別很大。容而且你做的染色和處理也是前提。一般凋...