westernblot轉膜過程中需要注意些什麼

2021-03-19 18:34:41 字數 788 閱讀 3269

1樓:匿名使用者

最重要的就是sds-page膠和膜之間不要有氣泡。。

其次就是轉膜的電壓和時間要和蛋白大小對應上。。。

組蛋白 western blot 轉膜是有什麼特別需要注意的嗎

2樓:匿名使用者

樓主,其實我不知道.但根據經驗推測為表面.因為膜孵育過抗體以後,暴光兩面訊號強度有顯著差異,背面訊號弱.如果蛋白嵌在膜裡面,則應該兩面無差別.

western blot轉膜時間太長有什麼影響

3樓:匿名使用者

蛋白復質印跡法(免疫印跡試驗)即制western blot。它是分子生物bai學、生物化學和免疫遺傳學du中常用的一種實

zhi驗方法。其dao基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的資訊。

蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里希生物研究所(friedrich miescher institute)的harry towbin在2023年提出的。在尼爾·伯奈特(neal bur***te)於2023年所著的《分析生物化學》(analytical biochemistry)中首次被稱為western blot。蛋白免疫印跡(western blot)是將電泳分離後的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支援物nc膜或pvdf膜上,然後用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術,現已廣泛應用於基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。

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