pcr擴增中,如何設計引物?
1樓：深空遊戲
1、引物5撇端可以修飾。引物3撇端不可修飾。引物3撇端要避開密碼子的第3位。
2、引物設計需要注意的地方很多，在大多數情況下，我們都是在知道已知模板序列時進行pcr擴增的。設計的目的是在兩個目標間取得平衡：擴增特異性和擴增效率。
3、pcr引物設計的11條**法則引物最好在模板cdna的保守區內設計。dna序列的保守區是通過物種間相似序列的比較確定的。
4、可以使用oligo6或者primer5等軟體設計。用這些軟體選擇引物，主要就是看引物的穩定性，形成二聚體的可能性，退火溫度等等引數。如果你的序列同源性不高，gc含量也還可以的話，可以使用一些經驗性原則。
5、pcr的技術的主要步驟及pcr引物設計的一般原則分述如下：pcr的技術的主要步驟：dna變性：（90℃-96℃）：雙鏈dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈dna。
pcr引物設計問題，求大神！！
2樓：網友
1.檢視你的引物的形成二聚體，錯配，cross dimer的△g的值是多少，如果大於，那麼問題不大，另外看是不是3『端形成了錯配等，如果有，能夠修改引物長度最好。△g最好不要超過兩位數。
值有差距一般調節引物長度。短的引物總歸tm值相對低。另外，退火的時候酶切位點那一段是不算的哦！他們不結合在鏈上，樓主這點注意（從你算得60%看你肯定是把前面的酶切位點也算進去了）
3.如果引物位置比較靈活的話換一下引物的位置，不過如果是p一段完整基因的話就算了。
4.我連分數60多的引物都p出來過，如果你一定要p出來的話，不要太相信電腦的資料，試試看。
5.如果引物還是不好，做的時候可以考慮用熱啟動降落pcr方法。如果有彌散，建議降低鎂離子量和dntp的量。濃度低就拿第一次pcr引物**後再去做一次pcr。
6.最後你可以選用一些高效的酶，比如primer star 或者kod等。
關於pcr引物設計：我做反轉錄pcr，目的基因是大鼠ace2和ace。
3樓：網友
你做反轉錄的目的是什麼？獲得這兩個基因cdna全長嗎？看你的問題和補充，搞不清楚你的最終目的是做什麼，也就不好針對性地回答。
4樓：網友
,你直接找測序公司幫你設計合成就好了。
麻煩哪位高手給我指出flash指令碼中sort 和sortOn 的區別？
sort對陣列元素排序。用法 陣列。sort 預設排序 按照字串字母順序排序，如果元素是數值，也會被當成字串來排序。 陣列。sort 排序方式 使用 排序方式尺圓枯 引數來排序，排序方式是一些定義好的整數常量。 陣列。sort 比較函式 使用自定陵洞義的比較函式，注意此處只可寫函式排序。sort...
麻煩哪位高手幫我估下這個翡翠鐲子，謝謝
糯種飄花，飄花似綠非綠，底子還算細膩，沒紋裂大概3000 5000。麻煩哪位高手幫我給這個翡翠鐲子估個價 懸賞 你好，看到你的訊息 o o 這個是翡翠 天然翡翠，俗稱a貨。看相片，應該是在室內回的燈光照答 反映出的資訊 天然翡翠，a貨 豆青的料子 有點淡色調 但是種質一般，不是很好 水頭也很差 形狀...
哪位高手幫忙翻譯一下以下信用證的條款啊
受益人裝船後要給申請人發一份傳真，傳真內容是裝船資訊，包括 p i number,p o number,l c number,name of vessel,forwarder,etd and port of loading,eta and port of discharge 以上傳真要作為單據提交，...