1樓：怯
紫外線吸收法可以測定蛋白質含量，並不需要可見分光光度計。
紫外線吸收法可以通過檢測蛋白質中的芳香族氨基酸，如酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的紫外線吸收來測定蛋白質的含量。這種方法不需要可見分光光度計，因為可見分光光度計通常用於測量吸收或透射光的波長在400-700奈米之間的樣品，而紫外線吸收法是用於測量小於400奈米的樣品。
實際上，紫外線吸收法是一種廣泛使用的測定蛋白質含量的方法，因為它具有靈敏度高、準確性好、操作簡便等優點。在進行紫外線吸收法測定蛋白質含量時，可以使用光譜儀或比色肢御皿進行測量。
除了紫外線吸收法，還有其他方法可以測定蛋白質含量，如lowry法、bradford法和biuret法等。不同的方法適用於不同型別的樣品和含量範圍，可以根據實際需求進行選擇。
總之，紫外線吸收法是一種有效且常用的測定蛋白質含量的方法，可以在不使用可見分光光度計的情況下進行測量。
拓展說明：在實際操作中，為了提高測量的準確性，還需要注意樣品的製備、波長的選擇、比色皿或光譜儀的校準等問題。此外，不同樣品的蛋白質含量也可能存在差異，需要根據實際情況進行調歷昌巖整和優化測定方法迅遲。
2樓：萬能答主劉
紫外線吸收法測定蛋白質含量通常不需要使用可見行友分光光度計，因為該方法的主要優點是具有快速、簡單、準確等特點。
使用可見分光光度計進行蛋白質含量測定可能會產生以下問題：
1. 需要使用光源，而可見分光光度計需要光源和光學系統，這會增加成本灶敬和複雜度。
2. 使用可見分光光度計需要對樣品進行光學處理，這可能會影響蛋白質的吸收光譜，從而影響測定結果。
3. 使用可見分光光度計需要對樣品進行光檔辯槐學測量，這需要一定的專業知識和經驗，可能不適合所有實驗室。
因此，使用紫外線吸收法測定蛋白質含量通常不需要使用可見分光光度計，而該方法具有快速、簡單、準確等特點，更適合實驗室使用。
紫外吸收法測定蛋白質含量
3樓：花落餅中
蛋白質分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，使蛋白質具有吸收紫外光的性質。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值)與蛋白質含量成正比。此外，蛋白質溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。
利用一定波長下，蛋白質溶液的光吸收值與蛋白質濃度的正比關係，可以進行蛋白質含量的測定。
紫外吸收法簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定後仍能**使用。低濃度的鹽，例如生化製備中常用的(nh4)2so4等和大多數緩衝液不干擾測定。特別適用於柱層析洗脫液的快速連續檢測，因為此時只需測定蛋白質濃度的變化，而不需知道其絕對值。
此法的特點是測定蛋白質含量的準確度較差，干擾物質多，在用標準曲線法測定蛋白質含量時，對那些與標準蛋白質中酪氨酸和色氨酸含量差異大的蛋白質，有一定的誤差。故該法適於用測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的蛋白質。
若樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物質，會出現較大的干擾。核酸的干擾可以通過查校正表，再進行計算的方法，加以適當的校正。但是因為不同的蛋白質和核酸的紫外吸收是不相同的，雖然經過校正，測定的結果還是存在一定的誤差。
此外，進行紫外吸收法測定時，由於蛋白質吸收高峰常因ph的改變而有變化，因此要注意溶液的ph值，測定樣品時的ph要與測定標準曲線的ph相一致。
紫外分光光度法測定蛋白質含量
4樓：ll港島妹妹
紫外分光光度法測定蛋白質含量實驗方法如下：
1、實驗部分。
儀器與試劑：labtech uv power紫外分光光度計；玻璃比色皿一套；考馬斯亮藍g250；牛血清蛋白；超純水。
試液的製備：牛血清蛋白標準溶液（1000ug/ml）的製備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加入超純水溶解並定容。考馬斯亮蘭g250試劑稱取100mg考馬斯亮蘭g250，溶於50ml95％的乙醇後，加入120ml85％的磷酸，用水稀釋至1公升。
2、結果與討論。
校正曲線的繪製，準確吸取1000ug/ml牛血清蛋白標準溶液分別加入到6只10ml試管中，然後用超純水補充到，各試管分別加入5ml考馬斯亮蘭g250試劑，混合均勻後，即可依次在595nm處測定吸光度。
精密度配製牛血清蛋白的考馬斯亮蘭溶液連續進樣6次，得到吸光度的相對標準偏差。以濃度為橫座標，吸光度為縱座標繪製校正曲線，校正曲線方程為a=，r=。
穩定性取1mg/ml牛血清蛋白標準溶液每十分鐘測定一次，50分鐘內的吸光度變化。
3、結論。該方法測定快速、簡便，干擾物少，是目前靈敏度較高的蛋白質含量測定的紫外分光光度法。
紫外吸收法測定蛋白著的適用範圍
5樓：
由於蛋白質中存在著含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，因此蛋白質溶液在280nm處具有紫外吸收高峰。在一定濃度範圍內，蛋白質溶液在此波長處的吸光度與其濃度呈正比關係，因此利用這一性質可進行蛋白質定量測定。 該法迅速、簡便、不消耗樣品、低濃度鹽類不干擾測定，可測定的蛋白質溶液。
由於蛋白質的紫外吸收高峰常因ph變化而寬宴謹改變，故應用此法時要注意溶液的ph。最好樣品的ph與標準曲線制定時的ph一致慎基。 本法對於測定與標準蛋白質中酪氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質誤差較大，故適用於測定與標準蛋祥旁白質酪氨酸、色氨酸這類氨基酸含量相仿的樣品；若樣品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物質，會出現較大幹擾。
例如混有核酸，核酸可吸收波長為280nm的紫外光，但它對260nm紫外光吸收更強。而蛋白質恰恰相反，280nm的紫外吸收值大於260nm紫外吸收值。運用280/260吸收差法則可以適當校正核酸對蛋白質濃度測定的干擾作用。
紫外吸收光譜測定物質含量為什麼採用石英比色皿
6樓：生活小沈童
一般紫外光區用石英比色皿，可見光區用玻璃比色皿，石英比色皿可用在全波段，玻璃比色皿只能用於340nm以上波長，因為玻璃不透紫外光。
玻璃在200~400nm對紫外有強吸收 而且這個吸收大到無法校正（這個是關鍵問題，做乙個背景吸收，再做一次空白樣就知道了） 石英比色皿在全波段都沒有非常強烈的吸收，不過用紫外光譜的時候，使用石英比色皿要注意方向。
7樓：網友
玻璃在200~400nm對紫外有強吸收。
而且這個吸收大到無法校正（這個是關鍵問題，你做乙個背景吸收，再做一次空白樣就知道了）
石英比色皿在全波段都沒有非常強烈的吸收。
不過用紫外光譜的時候，使用石英比色皿要注意方向。
8樓：網友
因為玻璃吸收紫外線，所以如果你的吸收峰在紫外光波長範圍，一定要用石英比色皿。
如果吸收峰在可見光波長範圍，則可以使用玻璃比色皿。
採用紫外光吸收法測定蛋白質含量，吸光度值為
9樓：考試資料網
答案】：c採用紫外光吸收法測定蛋白質含量，吸光度值為260 nm和280 nm。
求 怎樣用紫外分光光度法測蛋白質含量
10樓：信必鑫服務平臺
nm的光吸收法。
用標準曲線法進行測定。標準蛋白質溶液配製的濃度為 mg/ml。常用的標準蛋白質為牛血清清蛋白(bsa)。
nm和260 nm的吸收差法。
核酸對紫外光有很強的吸收，在280 nm處的吸收比蛋白質強10倍(每克)，但核酸在260 nm處的吸收更強，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm處的消光係數是280 nm處的2倍；而蛋白質則相反，其280 nm的紫外吸收值大於260 nm的吸收值。
nm與225 nm的吸收差法。
蛋白質的稀溶液由於含量低而不能使用280 nm的光吸收測定時，可用215nm與225 nm吸收值之差，通過標準曲線法來測定蛋白質稀溶液的濃度。
4、肽鍵測定法。
蛋白質溶液在238 nm處的光吸收的強弱，與肽鍵的多少成正比。因此可以用標準蛋白質溶液配製一系列50～500 mg/ml已知濃度的 ml蛋白質溶液，測定238 nm的光吸收值a238，以a238為縱座標，蛋白質含量為橫座標，繪製出標準曲線。未知樣品的濃度即可由標準曲線求得。
分光光度測定蛋白質含量的依據是
11樓：考試資料網
答案】：a大多數蛋白質在280nm波長處有特徵的最大吸收，這是由於蛋白質中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在的緣故，培山斗因此，配磨利用這個特異性吸收，可以計唯哪算蛋白質的含量。如果沒有干擾物質的存在，在280nm處的吸收可用於測定含量的蛋白質溶液。
部分純化的蛋白質常含有核酸，核酸在260nm波長處有最大吸收。
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