求教硬組織切片HE染色流程

2021-05-14 03:11:16 字數 4098 閱讀 8653

1樓:南京金益柏

很明顯應該先脫去

bai樹脂再染。但du

沒做過樹脂的,不清楚該zhi用哪個有dao機溶劑溶解洗脫。

我們實驗專室是用中性樹膠封屬的片,覺得封的不好就會用二甲苯浸泡,將樹膠溶掉(二甲苯是樹膠溶劑),再用酒精洗去二甲苯。其實he染色是可以在鏡下觀察的,每次染完後**再顯微鏡下觀察顏色是否滿意(**沾上水),淺了就繼續染,顏色深了就多分化下,達到理想結果了再封片

he染色的操作步驟是什麼?

2樓:筱曉小魚兒

將石蠟切片置於烘箱中60°C烤1~2h;

石蠟切片常規二甲苯,乙醇脫蠟至水,

蘇木素染10分鐘,

流水沖洗,去餘色,

0.7%鹽酸乙醇分化數秒鐘,

流水沖洗,切片變藍約15分鐘,

7.95%乙醇30秒鐘,

8.酒精性伊紅染30秒,

i 95%乙醇30秒鐘,

ii 95%乙醇30秒鐘,

i 100%乙醇30秒鐘,

ii100%乙醇30秒鐘,

石碳酸二甲苯30秒鐘,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)i二甲苯30秒鐘,

ii二甲苯30秒鐘,

中性樹膠封片。

he染色操作流程:

he染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態學最常用的染色方法,在質量較佳的he染色切片上,各種組織或細胞的一般形態結特點都可以觀察到。蘇木精染液為鹼性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。

he染色的操作步驟

3樓:tcoo_阿西

he染色步驟:

1、脫蠟,脫蠟二甲苯i、ii各10分鐘,事先準備好蓋玻片。

2、覆水,100%(i、ii)、90%、80%、70%酒精各5分鐘,自來水沖洗5分鐘×3。

3.、蘇木精染色5分鐘,根據染色情況,可以適當增加或減少染色時間,流水沖洗。

4、5%乙酸分化1分鐘,流水沖洗,用吸管滴加乙酸,佈滿玻片上的組織即可,分化後顏色變淺了一些,成為藍色。

5、返藍:返藍液,實驗室沒有,也可不用。

6、伊紅染色1分鐘,根據染色情況,可以適當增加或減少染色時間,流水沖洗。

7、脫水:70%、80%、90%、100%酒精各10秒,二甲苯1分鐘,可以在通風櫥自然晾乾再封

片,約5分鐘左右。

8、滴上中性樹膠,封片,用吸管滴上一滴即可,儘量少滴,但壓片後要將組織全部覆蓋完,避免中間有氣泡。

4樓:筱曉小魚兒

將石蠟切片置於烘箱中60°C烤1~2h;

石蠟切片常規二甲苯,乙醇脫蠟至水,

蘇木素染10分鐘,

流水沖洗,去餘色,

0.7%鹽酸乙醇分化數秒鐘,

流水沖洗,切片變藍約15分鐘,

7.95%乙醇30秒鐘,

8.酒精性伊紅染30秒,

i 95%乙醇30秒鐘,

ii 95%乙醇30秒鐘,

i 100%乙醇30秒鐘,

ii100%乙醇30秒鐘,

石碳酸二甲苯30秒鐘,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)i二甲苯30秒鐘,

ii二甲苯30秒鐘,

中性樹膠封片。

he染色操作流程:

he染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態學最常用的染色方法,在質量較佳的he染色切片上,各種組織或細胞的一般形態結特點都可以觀察到。蘇木精染液為鹼性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。

5樓:北京索萊寶科技****

【試劑材料]】

1.試劑:0.5%醇溶性伊紅染液,改良的哈瑞(harris)蘇木素,0.5%鹽酸酒精溶液

1.1 伊紅:

配製方法:中性紅 0.5g,80%酒精100ml,將伊紅溶於酒精內攪拌,全部溶解後即可使用。

1.2蘇木精:

配製方法:a液: 蘇木素1g,無水酒精10ml

b液:硫酸鋁鉀20g,蒸餾水200ml

兩液分別溶解後混合,加熱煮沸後,慢慢加入紅色氧化汞0.5g,此時有大量氣泡產生,故容器要大,以防液體溢位,然後將染液迅速冷卻,冷卻後過濾,並每100ml加入冰醋酸6ml,甘油10ml。

1.3 0.7%鹽酸酒精溶液

配製方法:鹽酸0.7ml,70%酒精100ml

2.材料:石蠟切片

[操作流程]

1.將石蠟切片置於烘箱中60°C烤1~2h;

2.石蠟切片常規二甲苯,乙醇脫蠟至水,

3.蘇木素染10分鐘,

4.流水沖洗,去餘色,5.0.7%鹽酸乙醇分化數秒鐘,

6.流水沖洗,切片變藍約15分鐘,

7.95%乙醇30秒鐘,

8.酒精性伊紅染30秒,

9.i 95%乙醇30秒鐘,

10.ii 95%乙醇30秒鐘,

11.i 100%乙醇30秒鐘,

12.ii100%乙醇30秒鐘,

13.石碳酸二甲苯30秒鐘,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)

14.i二甲苯30秒鐘,

15.ii二甲苯30秒鐘,

16.中性樹膠封片。

[實驗結果]: 鏡下觀察細胞核呈藍色;細胞漿一般呈紅色;膠原纖維呈不同程度的紅色,紅細胞呈亮紅色;

6樓:想自由8q玞

(1)二甲苯(i) 15min

(2) 二甲苯(ii) 15 min

(3)二甲苯:無水乙醇=1:1 2min

(4)100%乙醇(i) 5min

(5)100%乙醇(ii) 5 min

(6)80%乙醇 5min

(7)蒸餾水 5 min

(8)蘇木**染色 5 min

(9) 流水稍洗去蘇木** 1-3 s

(10) 1%鹽酸乙醇 1-3 s

(11) 稍水洗 10-30 s

(12)蒸餾水過洗 1-2 s

(13) 0.5%伊紅液染色 1-3 min

(14) 蒸餾水稍洗 1-2 s

(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s

(16) 95%乙醇(i) 2-3 s

(17) 95%乙醇(ii) 3-5 s

(18) 無水乙醇 5-10 min

(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min

(20) 二甲苯(i) 2 min

(21) 二甲苯(ii) 2 min

(22) 二甲苯(iii) 2 min

(23) 中性樹膠封固

注:1第(11)、(12)步可省去,(13)步沖水時間需延長至20-30min。

2第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用無水乙醇。 (1)冰凍切片固定 10~30 s

(2)稍水洗 1~2 s

(3)蘇木**染色(60°C) 30~60 s

(4)流水洗去蘇木** 5~10 s

(5)1%鹽酸乙醇 1~3 s

(6)稍水洗 1~2 s

(7)促藍液返藍 5~10 s

(8)流水沖洗 15~30 s

(9)0.5%曙紅液染色 30~60 s

(10)蒸餾水稍洗 1~2 s

(11)80%乙醇 1~2 s

(12)95%乙醇 1~2 s

(13)無水乙醇 1~2 s

(14)石炭酸二甲苯 2~3 s

(15)二甲苯(i) 2~3 s

(16)二甲苯(ii) 2~3 s

(17)中性樹膠封固。

注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用無水乙醇。

染色結果:細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。 細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。

細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。

著色情況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活週期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜鹼,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。

(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;

(2)染色核漿分明,紅藍適度,透明潔淨,封裱美觀。

在機械加工中,硬切削是什麼意思,機械零件的切削加工中,有無加工硬化現象

硬切削是指使用cbn實體刀具 cbn刀頭或陶瓷刀具來加工淬硬的工件。用硬切削這 版種新工藝可以切權削淬硬的工件。用硬切削這種新工藝可以切削淬硬鋼 灰鑄鐵 球墨鑄鐵 粉末 冶金和特殊材料。當然,也有一些材料如青銅等不適合採用硬切削。用硬切削可進行車削 表面加工 攻螺紋 銑削 開槽 靠模加工 車削錐面。...