1樓:匿名使用者
多轉殖抗體是一組具有相同抗原,但不一定具有相同抗原表位的抗體。
如何製備多轉殖抗體
2樓:蒼茫中的塵埃
目的是製備幾種單轉殖抗體的混雜物。
實驗方案根據抗原的性質不同而異。下面以製備家兔抗人igg免疫血清為例作具體說明。
1. 用剪刀剪去家兔兩後腳掌的部分兔毛,以酒精及碘酒消毒**;
2. 第一次免疫: 用2ml注射器吸取弗氏完全佐劑(fca)乳化的抗原(人igg)下稱fca-igg)液1ml,每側腳掌皮下各注入。
3. 第二次免疫:間隔10-14天后,於兩側 窩及鼠蹊部腫大的淋巴結內注入fca-igg,每個淋巴結注,其餘注入淋巴結附近皮下共1ml。
如淋巴結未腫大或腫大不明顯時,直接注入兩側 窩及鼠蹊部皮下。
4. 間隔7-10天后,從耳靜脈採血,分離血清,以雙相瓊脂擴散試驗測定免疫血清的抗體效價(即試血)。效價至少應達到1∶16以上時才能放血。
5. 若效價未達到要求,可用不加佐劑的抗原液(人igg)耳靜脈內注射免疫。即於1周內注射3次,分別為。
間隔1周再試血。如效價達到要求應立即放血。另外,也可在第2次免疫後,以弗氏不完全佐劑(fia)乳化的抗原(人igg)(簡稱fia-igg)再免疫1-2次。
注射部位、劑量和間隔均同第2次,再試血測抗體效價,如效價達到要求立即放血。
我們實驗室現在通用的方案是:
第一次免疫:1ml弗氏完全佐劑(fca)與100ug蛋白抗原/1mlpbs(乙隻兔子用量)充分研磨混勻,達到「油包水」的狀態,分四點注射:雙腋下、腹股溝。
第二次免疫:間隔4周,換用弗氏不完全佐劑,其餘同第一次免疫。
第三次免疫:同上。
測定血清效價,間接elisa,10ug/ml抗原包被,效價1:64000以上可以放血,也可以再加強免疫一次:生理鹽水稀釋抗原,耳緣靜脈注射,一週內放血。
簡述單轉殖抗體的製備方案,流程應用和優點!(急,急,急!)
3樓:德基廣場
1.向生物體內注射抗原,使其發生免疫反應。
2.從血液中分離已免疫的效應b細胞。
3.培養骨髓瘤細胞。
4.把骨髓瘤細胞和效應b淋巴細胞融合,得到雜交瘤細胞。
5.篩選並培養雜交瘤細胞,產生單轉殖抗體。
優點:純度高,特異性強,在疾病診斷上準確,高效,簡易,快速。
下圖是單轉殖抗體製備流程階段示意圖。 (1)___________技術是單轉殖抗體技術的基礎。(2)根
4樓:幽靈軍團
(1)動物細胞培養(微生物培養)
2)選擇。3)特異性強,靈敏度高。
4)滅活的病毒。
5)在體外大量增殖 分泌特異性抗體(6)骨髓 造血幹。
7)主動運輸(主動吸收)
製備單轉殖抗體時,選擇培養基要選擇融合的( )。
5樓:考試資料網
答案】:b單轉殖抗體技術的流程為:①小鼠脾細胞和骨髓瘤細胞在聚乙二醇(peg)作用下發生細胞融合;②加入hat選擇培養基(唯亮含h、a和t)後,未融合的骨髓瘤細胞因其從頭合成途徑被氨基蝶呤阻斷,指汪寬而又缺乏hgprt不能利用補救途徑合成dna,從而死亡;③未融合的脾細胞難以在體外培養而死陵卜亡;④融合細胞因從脾細胞獲得hgprt,故可在hat選擇培養基中存活和增殖。
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單克隆抗體的優點是 理化性狀高度均 一 生物活性單 一 與抗原結合的特異性強 便於人為處理和質量控制,並且 容易。這些優點使其廣泛應用於抗腫瘤等領域 單克隆抗體和多克隆抗體有何區別,單抗有什麼的缺點 單克隆抗體bai的優點與 du侷限性 單克隆抗體和zhi多克隆抗體各有其優點dao 1.單克隆抗體的...
免疫組化是選用單克隆還是多克隆抗體
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做熒光免疫時需要驗證抗體的特異性嗎
可以選abcam的抗體,或者almone的抗體。選ihc p 型別的。不過記住如果染小鼠一抗的 就不要選小鼠。如果雙染不要選同一 的抗體。能夠做組織免疫熒光的抗體可以做細胞免疫熒光嗎 5 你好!你用的是單抗嗎?如果是單抗,他們會有說明書說上面是可適用的實驗範圍,那個是給他們驗證過的。如果沒有,你也可...