pcr逆轉錄時加rna時間長了有影響嗎

2025-07-16 07:30:22 字數 2556 閱讀 3280

1樓:混氣機

在pcr逆轉錄過程中加rna的時間長短會對整個pcr反應的結果產生影響。通常來說,加rna的時間不能過短,否則可能會導致rna不完全反轉錄,導致後續pcr反應的訊號較弱。然而,加rna的時間過長也可能會造成一些問題。

一方面,過長的rna反轉錄時間可能會導致rna的分解或退化,從而影響pcr反應的訊號;另一方面,遠超過rna應反轉錄的時間也可能導致無法正常放大逗液舉pcr反應產物。因此,為了獲得最佳的pcr結果,需要根據實驗情況和試劑盒說明的建議來確定rna反轉錄的時間。此外,還應該注意rna儲存的條件山碧和反轉錄試劑的質量埋賣,以確保獲得穩定的pcr訊號。

逆轉錄和pcr的原料相同嗎

2樓:

摘要。親<>

親<>《您好!很高興為您提供服務!逆轉錄和pcr的原料相同的。

相同點是幾種組分進行配製的混合液;不同點是混合的配製液和方法不同。逆轉錄引物有引物是oligo、隨機引物、基因特異性引物三種進行配製,而pcr擴增的引物有dntp、dna聚合酶、擴增模板和pcr反應緩衝液這三種進行配置。反轉錄和pcr擴增中使用的引物都是幾種組分配製,但不是同幾種的組分配製的。

pcrmix一般是將除了模板、引物以外其他的組分按照最佳配比混合在一起的混合液,使用時直接加入模板和引物就可以,這樣做節省時間,也不用考慮反應體系效能問題。

逆轉錄和pcr的原料相同嗎。

親<>親<>《您好!很高興為您提供服務!逆轉錄和pcr的原料相同的。

相同點是幾種組分進行配製的混合液;不同點是混合的配製液枝族和方法不同。逆轉錄引物有引物是oligo、隨機引物、基因特異性引物三種進行配製,而pcr擴增的引物有dntp、dna聚合酶、擴增模板和pcr反應緩衝液這三種進行配置。反轉錄和pcr擴增中使用的引物都是猜纖幾種組分配製,但不是同幾種的組分配製的。

pcrmix一般是將除了模板、引物以外其他的組分按照最佳配比混合在一起的混合液,使用時直接加入模板和引物就可以,這樣做節省時間,也不猛兆弊用考慮反應體系效能問題。

逆轉錄是脫氧核糖核苷酸,pcr是脫氧核苷三磷酸,這兩個不是不一樣嗎。

老師還在嗎。

用處一樣的親戚。

後者既提供核苷酸又提供能量,前者只提供核苷酸,怎麼是一樣的?

老師?脫氧核糖核苷三磷酸 和脫氧核糖核苷酸的區別1.結構上不同 脫氧核糖核苷三磷酸在結構上比脫氧核糖核苷酸多了三個磷酸基團,多兩個高能磷酸鍵。

2.二者的成分組成不同脫氧核糖核苷三磷姿吵蘆酸:主要包括腺嘌呤脫氧核糖核苷三磷酸(atp),鳥嘌呤脫氧碰則核糖核苷三磷酸(gtp),胞嘧啶脫氧核跡帶糖核苷三磷酸(ctp),胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸(ttp)。

pcr反應需要rna酶

3樓:公涵闞平松

a、用於pcr的引段敬物長度通常為20--30個核苷酸,是一小段單鏈dna或rna,a錯誤;

b、pcr反應所需要的材料是脫氧核糖核苷酸,b錯誤;

c、pcr反應過程中,延伸時溫度約為握塵慎72℃,此時需要酶的過程,說明所需要的酶在兄羨60℃不會變性,c錯誤;

d、pcr反應需要在一定的緩衝溶液中進行,d正確.故選:d.

為什麼rna逆轉錄後還要轉錄回來?

4樓:學習走出壁壘

這裡的初始rna一般都是轉錄自含有內含子的dna,也就是不提供編碼蛋白質的一段dna序列。真核生物可以識別這種結構,跳過去繼續轉錄。但是原核細胞不能,所以,如果想要在原核細胞中高度表達這個基因所編碼的蛋白質,就必須使用mrna進行逆轉錄,這樣生產出來的dna不含有內顯子,原核細胞可以放心地按照這個逆轉錄出來的dna來編碼蛋白質。

但是,原核細胞沒有內質網,高爾基體等修飾蛋白質的細胞器,所以,編碼出來的蛋白質一般沒有活性,需要經過一系列處理才會恢復活性。

總的來說,就是為了避免內顯子對原核細胞編碼識別的影響。

5樓:網友

因為rna不能自身實現複製和轉錄,必須經過dna才能實現複製和轉錄。

逆轉錄是以rna為模板合成dna的過程,即rna指導下的dna合成。逆轉錄過程是某些病毒的複製形式之一。

dna可以通過複製增加數量;dna通過轉錄生成rna,且dna轉錄形成rna時,rna的數量理論上沒有限制。但這是rna自己做不到的。rna就是rna,它不能自我複製,也不能以自身為模板進行轉錄。

所以rna病毒要實現複製增殖,就必須先用自己的rna逆轉錄為dna,再用dna轉錄形成新的rna。

如果沒有逆轉錄過程,rna病毒就不能實現增殖。

質粒轉染細胞後多久能提rna做pcr

6樓:匿名使用者

質粒轉染細胞後多copy久能提bairna做pcr實驗室一直都是用日du常型質粒抽提試劑zhi盒,轉染細胞沒問題。

我覺得只要dao是注意以下2點就可以了:

1,注意大腸桿菌(escherichia coli)本身的汙染,收集菌體沉澱時防止菌液散落,經常用75%的乙醇擦拭手套。

2,最後洗脫時最好使用無內毒素的水,我們是用注射用水的。

無論是小提還是大提我們都是用的日常型的,並沒有刻意用轉染級的,因為轉染量大,去內毒素的操作太麻煩,損失太大。

為什麼RNA逆轉錄後還要轉錄回來?

這裡的初始rna一般都是轉錄自含有內含子的dna,也就是不提供編碼蛋白質的一段dna序列。真核生物可以識別這種結構,跳過去繼續轉錄。但是原核細胞不能,所以,如果想要在原核細胞中高度表達這個基因所編碼的蛋白質,就必須使用mrna進行逆轉錄,這樣生產出來的dna不含有內顯子,原核細胞可以放心地按照這個逆...

rna濃度50能進行逆轉錄嗎

為了準確地進行基因表達量分析,必須滿足只有cdna作為模板檢出的先決條件,但total rna中常常混有基因組dna,並可晌畢碼以直接作為pcr反應的模板進行擴增,因此會造成解析結果不準確。前面我們介紹數宴了細胞rna的提取方法,在提取rna之後,需要在逆轉錄酶的作用下將rna逆轉錄生成cdna,進...

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