吖啶橙螢光染色的優缺點,吖啶橙的介紹

2025-07-18 18:15:11 字數 2225 閱讀 8976

1樓:甜玉栗

吖啶橙是一種常用的螢光染色劑,其優缺點如下:

優點:1. 顯色快:吖啶橙染色後物辯豎,可以在短時間內顯現出明顯的螢光訊號,且螢光強度高,檢測效果較好。

2. 觀察方便:吖啶橙染色後,可以直接在顯微鏡下觀察到細胞核的螢光訊號,不需要進行其他染色或處理。

3. 穩定性好:吖啶橙染色劑具有較好的穩定性,可以長時間儲存,不易失效。

缺點:1. 毒性:吖啶橙染色劑對人體和環境具有一定的毒性,需要注意安罩大全操作。

2. 對細胞生長有影響:灶豎吖啶橙染色劑會影響細胞的生長和代謝,可能會導致細胞死亡或其他異常現象。

3. 不適用於定量分析:由於吖啶橙染色的螢光強度與dna量有關,而不是與細胞數量有關,因此不適用於定量分析。

總之,吖啶橙螢光染色具有顯示快、觀察方便和穩定性好等優點,但也存在毒性、影響細胞生長和不適用於定量分析等缺點。在使用時需要根據具體情況進行選擇和注意安全操作。

2樓:網友

啶橙螢光染色是一種常用的細胞染色方法,它的優點主要包括以下幾個方面:

1. 顯色快速:啶橙螢光染色可以在短時間內完成,通常只需要幾分鐘就可以得到顯色結果,這對於研究人員來說非常便利。

2. 顯色效果好:啶橙螢光染色可以在細胞內染出較為明顯的螢光訊號,能夠直接觀察到細胞內的形態和結構。

3. 適喊睜用性廣泛:啶橙螢光染色適用於各種細胞型別,包括哺乳動物細胞、細菌、酵母等,因此在廣泛的生物學研究中得到了廣泛應用。

然而,啶橙螢光染色也存在一些缺點,主要包括以下幾個方面:

1. 靈敏度較低:啶橙螢光染色的靈敏度相對較低,對於某些細胞型別或細胞器結構的檢測可能不夠敏感。

2. 特異性較差:啶橙螢光染色對於不同型別的細胞結構染色的特異性可能不夠好,可能會導致一些誤判。

3. 可重複性有限:由於啶橙巨集稿螢光染色的結果受到一些實驗條件的影響,如螢光燈的強度、染色劑蔽滲孝的濃度等,因此可重複性可能有限。

吖啶橙的介紹

3樓:桃紙

吖啶橙:3,6-(二甲胺基)吖啶鹽酸鹽,分子式c17h19n3 · hcl · zncl₂, 分子悉殲量,是一種螢光色素,其檢測激發濾光片波長488nm,阻斷濾光片波長515nm。它與細胞中dna和rna結合量存在差別,可發出不同顏色的螢光,與dna結合量少發綠色螢光,與rna結合量多發桔黃色或桔紅色螢光。

該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核dna和rna染色。因此,在螢光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正睜祥衝常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻螢光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上緻密濃染的黃綠色螢光,或黃綠色宴局碎片顆粒;而壞死細胞黃螢光減弱甚至消失。

吖啶橙ao常與溴化乙啶eb合用雙染,因eb只染死細胞使之產生桔黃色螢光,由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌於兩個相鄰的鹼基對之間,這樣在dna複製過程中,會使dna鏈增加或缺失乙個鹼基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。

為什麼當加入吖啶橙螢光染料後葉綠體的自發螢光會消失?

4樓:匡雅霜

這是螢光淬滅現象所致逗大。

吖啶橙可透過細胞膜,可能是由於吖啶橙陽離子進入葉綠磨指清體後通過影響葉綠素的結構和所處的化學環境,導致葉綠素的自發瞎前螢光淬滅。

在產生螢光的物質的溶液中,加入鹽等物質,會使溶液的吸光度下降而螢光強度變小。)

吖啶橙的基本資訊

5樓:手機使用者

簡稱:aoao能與無機酸形成鹽,具有綠色螢光。如果再稀釋的話,便水解成遊離的ao,而呈現紫色螢光。

吖啶橙/溴化乙錠雙螢光染色測定pc12細胞凋亡裂鬧(acridine orange/ethidium bromide, ao/eb):

1)細胞爬片:在6孔培養板中預先置入玻璃蓋玻片,接種細胞懸液,干預後,予95%乙醇慶禪固定15分鐘,微幹,然後準備螢光染色。將100mg/l溶於pbs的吖啶橙和100mg/l溶於pbs的溴化乙錠各5μl(臨用前混合加入,加樣量宜小,有時各2μl-5μl足夠,量太大容易形成細胞凋亡的假陽性),在肆差罩照相前混勻後加入,輕輕吹打,30秒後用雷射共聚焦顯微鏡觀察照相。

有人用15mg吖啶橙溶於100ml 的pbs中過濾,避光儲存)計取5個視野,共100個細胞中凋亡細胞百分數。

2)如製成細胞懸液:取100μl pbs稀釋的細胞懸液,加2μl的染色液,其中ao/eb,各含100μg/ml,加入染料30秒後觀察攝像。

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