1樓：義翹神州加油
細胞培養，方法見國家藥典。
但是細胞培養耗時更長。
免疫熒光染色的一抗，二抗分別用什麼稀釋？ 5
關於細胞免疫熒光染色的問題
2樓：匿名使用者
(1)你的二抗是用fitc標記的，為避免熒光分解，分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/l ph9.0-9.5的碳酸氫鹽緩衝液，後者能使玻片透明;
(3)關於免疫酶染色，如果是用過氧化物酶做標記，就必須用3%h2o2以去除內源性過氧化物酶;2n鹽酸需要使用，目的是使dna變性，讓brdu抗體能夠充分地與已經摻入的brdu結合。
做間接法免疫熒光染色，如何設定對照?
參考見解:最好是同一視野在未用熒光激發下進行對照，看是否非特異性染色。
(1)空白對照:如果你做的是石蠟切片免疫組化，這個對照必須有，目的是看自發熒光，脫蠟後直接在熒光顯微鏡下觀察。
(2)陰性對照:標本直接滴加二抗，呈陰性反應。
(3)抗原對照:標本加同種動物的未免疫血清，以pbs沖洗後，在加抗免疫球蛋白熒光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體，應呈陰性反應。
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
3樓：糖豆豆
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同：
直接免疫熒光的實驗方案通常較短，因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。
直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗，增加了複雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，每個二抗需要靶向不同的物種並偶聯至不同染料。
直接免疫熒光方法中獲得的訊號與間接方法相比可能較弱，因為直接方法中沒有使用二抗進行訊號放大。免疫熒光多個二抗結合一抗可使訊號放大。
2、直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的相同之處：
免疫熒光 (if) 或細胞成像技術使用抗體將熒光染料（也稱為熒光素或熒光物）標記到特異性目標抗原上，所用熒光染料有諸如異硫氰酸熒光素 (fitc) 等。而通過化學方法偶聯熒光素的抗體被廣泛使用於if實驗中。
根據熒光素與一抗還是二抗偶聯，我們將 if 方法分為兩類：直接 if-使用單個抗體，該抗體直接指向目的靶標，一抗與熒光素直接偶聯；間接 if-使用兩個抗體，一抗未偶聯，熒光素偶聯的二抗指向一抗，並用於檢測。
間接法測抗體基本原理：
染色程式分為兩步，第一步，用未知未標記的抗體（待檢標本）加到已知抗原標本上，在溼盒中37℃保溫30min，使抗原抗體充分結合，然後洗滌，除去未結合的抗體。
第二步，加上熒游標記的抗球蛋白抗體或抗igg、igm抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應，標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合，從而可鑑定未知抗體。
4樓：天蠍神經俠侶
免疫熒光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體
什麼是免疫熒光染色診斷
5樓：go不留痕跡
用於檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質結合，用於檢測或定位抗體。 用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞（或組織）化學技術。
原理：免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。
免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合後，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
該技術的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是：非特異性染色問題尚未完全解決，結果判定的客觀性不足，技術程式也還比較複雜。
6樓：匿名使用者
近年來，熒光顯微鏡技術特別是免疫熒光技術得到了飛速發展，作為一種研究方法或實驗手段，已被廣泛地應用於醫學科學領域內各種基礎理論研究和臨床診斷。
免疫熒光染色診斷，齊氏生物認為 查的應該是免疫方面的檢查，一般是臨床用於疾病的診斷。
免疫細胞化學染色和免疫熒光有什麼區別？
7樓：再意吧
同志這不是化學範疇的
immunofluorescence technic又名免疫熒光
種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術（fluorescentantibodytechnique）。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術，因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結合，用於檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質結合，用於檢測或定位抗體，但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣稱為熒光抗體技術
immunocytochemical staining又名免疫細胞化學染色
組織化學染色是基於已知的化學反應,在細胞原位上顯示出細胞中的化學成分以確定細胞的...在肝癌患者的腹水、胸水中，細胞的形態相對難以辨認，因為脫落的肝癌細胞經過積液的浸泡，在很大程度上與間皮細胞相似，而間皮細胞由於刺激也會出現很大的變化
這兩種是幾乎完全不同的吧
倒是文字比較像
如何做細菌的免疫熒光
8樓：匿名使用者
細胞培養，方法見國家藥典。但是細胞培養耗時更長。
9樓：南京金益柏生物科技****
最好將載玻片先用多聚賴氨酸處理一下，這樣菌容易留在玻片上。若這種蛋白是跨膜蛋白，則最好加上通透劑。
什麼是免疫熒光染色診斷？
10樓：匿名使用者
這個資料應該可以幫你。
11樓：稽深樸茵
近年來，熒光顯微鏡技術特別是免疫熒光技術得到了飛速發展，作為一種研究方法或實驗手段，已被廣泛地應用於醫學科學領域內各種基礎理論研究和臨床診斷。
免疫熒光染色診斷，齊氏生物認為
查的應該是免疫方面的檢查，一般是臨床用於疾病的診斷。
免疫熒光染色gs是一抗還是二抗,免疫熒光染色的一抗，二抗分別用什麼稀釋？
免疫熒光染色快捷,靈敏.標本冰凍切片,石蠟切片?切片厚薄?影響抗孵育間.選用較佳抗工作濃度.二抗需a液b液室溫混合15鍾再用.標本需儲存 20度.免疫熒光染色的一抗，二抗分別用什麼稀釋？5 pbs稀釋。當然最好用封閉液直接稀釋，再加一點tritonx100效果好。培養液成分太多了。而且固定之後細胞都...
免疫熒光二抗的選擇求教,請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適
要是你要用的抗體不就行了，國產跟國外的差別也不是那麼大好不好？建議樓主先做試驗試試，個人覺得影響不會很大。只要fitc標記的羊抗鼠抗體是合格產品即可。經費有限的話，只要得到試驗結果不就行了。請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適 一般來說,選擇合適的二抗需要從下面幾個方面考慮 1.二抗應選用與使用...
什麼叫做免疫組化的非特異性染色,免疫熒光結果都是非特異性染色，不知道是什麼原因
免疫組化非特異性染色建議樓主還是查詢文獻吧，一般文獻中講解比較詳細的哈 如果你的 和操作過程都是一樣，而一組沒訊號 另一組卻有訊號，那出現差異的原因就應該是一抗的反應過程 不知你的顯色過程是怎樣的 而你要是能確定看到的結果不是基因表達的實際情況，即你所說的非特異染色，那就應該是抗體的原因，單就非特異...