1樓:風中行者之狄風
一、黴菌和酵母菌介紹:
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類,通常是單細胞,呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。黴菌也是真菌,能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴菌和酵母廣泛分佈於自然界並可作為食品中正常菌相的一部分。長期以來,人們利用某些黴菌和酵母加工一些食品,如用黴菌加工乾酪和肉,使其味道鮮美;還可利用黴菌和酵母釀酒、制醬;食品、化學、醫藥等工業都少不了黴菌和酵母。但在某些情況下,黴菌和酵母也可造成中腐敗變質。
由於它們生長緩慢和競爭能力不強,故常常在不適於細菌生長的食品中出現,這些食品是ph低、溼度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品,含有抗菌素的食品等。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍,以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術,它們能轉換某些不利於細菌的物質,而促進致病細菌的生長;有些黴菌能夠合成有毒代謝產物-黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。
例如,酵母在新鮮的和加工的食品中繁殖,可使食品發生難聞的異味,它還可以使液體發生混濁,產生氣泡,形成薄膜,改變顏色及散發不正常的氣味等。因此黴菌和酵母也作為評價食品衛生質量的指示菌,並以黴菌和酵母計數來制定食品被汙染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的黴菌和酵母限量標準。
我國已制訂了一些食品中黴菌和酵母的限量標準。
二、檢驗方法:
黴菌和酵母的計數方法,與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為:將樣品製作成10倍梯度的稀釋液,選擇3個合適的稀釋度,吸取1ml於平皿,傾注培養基後,培養觀察,計數。
對黴菌的計數,還可以採用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標準參見:
gb4789.15-94,《中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗黴菌和酵母計數》
三、說明:
1.樣品的處理。為了準確測定黴菌和酵母數,真實反映被檢食品的衛生質量,首先應注意樣品的代表性。對大的固體食品樣品,要用滅菌刀或鑷子從不同部位採取試驗材料,再混合磨碎。
如樣品不太大,最好把全部樣品放到滅菌均質器杯內攪拌2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2.樣品的稀釋:為了減少櫚稀釋倍數的誤差,在連續遞增稀釋時,每一稀釋度應更換一根吸管。在稀釋過程中,為了使黴菌的孢子充分散開,需用滅菌吸管反覆吹吸50次。
3.培養基的選擇:在黴菌和酵母計數中,主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基(pda):黴菌和酵母在pda培養基上生長良好。用pda作平板計數時,必項加入抗菌素以抑制細菌。
孟加拉紅(虎紅)培養基:該培養基中的孟加拉紅和抗菌素具有抑制細菌的作用。孟加拉紅還可抑制黴菌菌落的蔓延生長。在菌落背面由孟加拉紅產生的紅色有助於黴菌和酵母菌落的計數。
高鹽察氏培養基:糧食和食品中常見的麴黴和青黴在該培養基上分離效果良好,它具有抑制細菌和減緩生長速度快的毛黴科菌種的作用。
4.傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度,每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45°C,立即傾注並旋轉混勻,先向一個方向旋轉,再轉向相反方向,充分混合均勻。
培養基凝固後,把平皿翻過來放溫箱培養。大多數黴菌和酵母在25-30°C的情況下生長良好,因此培養溫度25~28°C。培養3d後開始觀察菌落生長情況,共培養5d觀察記錄結果。
5.菌落計數及報告:選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板,取兩個平板菌落數的平均值,乘以稀釋倍數報告。
固體檢樣以g為單位報告,液體檢樣以ml 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6.黴菌直接鏡檢計數法:對黴菌計數,可以採用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下,黴菌菌絲具有如下特徵:
平行壁:黴菌菌絲呈管狀,多數情況下,整個菌絲的直徑是一致的。因此在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是區別黴菌菌絲和其他纖維時最有用的特徵之一。
橫隔:許多黴菌的菌絲具有橫隔,毛黴、根黴等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀:薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質,在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝:如菌絲不太短,則多數呈分枝狀,分枝與主幹的直徑幾乎相同,有分枝是鑑定黴功得出可靠的特徵之一。
菌絲的頂端:常呈鈍圓形。無折射現象。
凡有以上特徵之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲,凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6;
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6;
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
一叢菌絲可視為一個菌絲,所有菌絲(包括分枝)總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果,計算陽性視野所佔比例,並以陽性視野百分數(%)報告結果。計算公式:
每件樣品陽性視野(%)=(陽性視野數 / 觀察視野數)×100
說明黴菌、酵母菌數的測定與菌落總數的測定有什麼相同的地方和不同的地方
2樓:匿名使用者
菌落總數是所有菌落的總數!只要採集你想要的地方的細菌就好,經過培養在數出數量。
而黴菌和酵母菌的數量測定則要用選擇培養基!
培養過程和步驟是一樣的,只是培養基不同
3樓:紅頂商人
菌落總數測定,如果你用的是平板計數方法,在pda培養基上培養,那麼理論上來說黴菌回+酵母就等於菌落總數答(不包含要篩選樣品裡別的細菌,只是真菌與酵母),因為pda培養基就是選擇性培養基.如果你用別的培養基進行培養,那麼當然就不一樣了.
菌落總數是不是包括黴菌和酵母菌
4樓:匿名使用者
菌落總數測定,如果你用的是平板計數方法,在pda培養基上培養,那麼理論上來說黴菌+酵母就等於菌落總數(不包含要篩選樣品裡別的細菌,只是真菌與酵母),因為pda培養基就訂膽斥感儷啡籌拾船漿是選擇性培養基.如果你用別的培養基進行培養,那麼當然就不一樣了.
操作流程幾乎相同,採用培養基不同,以及培養的溫度和時間不同。 菌落總數採用pca或者na培養基,培養溫度為36度48小時。 黴菌酵母採用孟加拉紅培養基,培養溫度為28度,3—5天。
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