限制性核酸內切酶的型別,限制性內切酶有幾類?各有什麼特點

2021-03-19 18:20:51 字數 4743 閱讀 6070

1樓:手機使用者

根據限制酶的結構,輔因子的需求切位與作用方式,可將限制酶分為三種型別,分別是第一型(type i)、第二型(type ⅱ)及第三型(type ⅲ)。 與第一型限制酶類似,同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列,切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。

例如:hinfⅲ。

限制性內切酶有幾類?各有什麼特點

2樓:soumns馬

根據限制酶的結構,輔因

子的需求切位與作用方式,可將限制酶分為三種型別,分別是第一型(type i)、第二型(type ⅱ)及第三型(type ⅲ)。

第一型限制酶

同時具有修飾(modification)及識別切割(restriction)的作用;另有識別(recognize)dna上特定鹼基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距離識別位(recognition site)可達數千個鹼基之遠。例如:ecob、ecok。

第二型限制酶

只具有識別切割的作用,修飾作用由其他酶進行。所識別的位置多為短的迴文序列(palindrome sequence);所剪下的鹼基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上,實用性較高的限制酶種類。

例如:ecori、hindⅲ。

第三型限制酶

與第一型限制酶類似,同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列,切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。例如:hinfⅲ。

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限制性內切酶分類性質

根據酶的功能特性、大小及反應時所需的輔助因子,限制性內切酶可分為兩大類,即i類酶和ⅱ酶。最早從大腸桿菌中發現的ecok、ecob就屬於i類酶。其分子量較大;反應過程中除需mg2+外,還需要s-腺苷-l甲硫氨酸、atp;在dna分子上沒有特異性的酶解片斷,這是i、ⅱ類酶之間最明顯的差異。

因此,i類酶作為dna的分析工具價值不大。ⅱ類酶有ecor i、bamh i、hind ⅱ、hind ⅲ等。其分子量小於105道爾頓;反應只需mg2+;最重要的是在所識別的特定鹼基順序上有特異性的切點,因而dna分子經過ⅱ類酶作用後,可產生特異性的酶解片斷,這些片斷可用凝膠電泳法進行分離、鑑別。

限制性內切酶識別dna序列中的迴文序列。有些酶的切割位點在迴文的一側(如ecor i、bamh i、hind等),因而可形成粘性末端,另一些ⅱ類酶如alu i、bsur i、bal i、hal ⅲ、hpa i、**a i等,切割位點在迴文序列中間,形成平整末端。

3樓:匿名使用者

限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。

這類酶如ecob、ecok等。

第二類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的dn**段,並能構建來自不同基因組的dn**段,形成雜合dna分子。

因此,這種限制性內切酶是dna重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸,少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。第二類限制性內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序,即有一箇中心對稱軸,從這個軸朝二個方向「讀」都完全相同。

這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割,結果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互補的,可形成氫鍵,所以稱為粘性末端。另一種是在同一位置上切割雙鏈,產生平頭末端。

第三類限制性內切酶也有專一的識別順序,但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。

因此,這種限制性內切酶切割後產生的一定長度dn**段,具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆dn**段沒有多大用處。

限制性核酸內切酶有哪幾種型別?哪一種型別的限制酶最適合於基因工程,為什麼

4樓:厲害的雞湯麵

限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。

這類酶如ecob、ecok等。

第二類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的dn**段,並能構建來自不同基因組的dn**段,形成雜合dna分子。

因此,這種限制性內切酶是dna重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸,少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。第二類限制性內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序,即有一箇中心對稱軸,從這個軸朝二個方向「讀」都完全相同。

這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割,結果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互補的,可形成氫鍵,所以稱為粘性末端。另一種是在同一位置上切割雙鏈,產生平頭末端。

第三類限制性內切酶也有專一的識別順序,但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。

因此,這種限制性內切酶切割後產生的一定長度dn**段,具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆dn**段沒有多大用處。

限制性核酸內切酶是什麼?

5樓:

restriction endonuclease簡稱限制性核酸酶。 這是一類能從dna分子中間水解磷酸二酯鍵,從而切斷雙鏈dna的核酸水解酶。它們不同於一般的脫氧核糖核酸酶(dnase),它們的切點大多很嚴格,要求專一的核苷酸順序——識別順序。

長期以來,難以深入研究的dna大分子,藉此可以切割成特定的小片段來分析。限制性核酸酶的發現,為基因結構、dna鹼基順序分析和基因工程的研究開闢了途徑。為此,w.

阿爾伯,h.史密斯和d.內森斯三人共同獲得了2023年諾貝爾生理學或醫學獎。

其實,限制酶、限制性內切酶都一樣,都是限制性核酸內切酶的簡稱。

6樓:匿名使用者

限制性內切酶(restriction endonuclease):一種在特殊核甘酸序列處水解雙鏈dna的內切酶。ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主dna的甲基化,又催化非甲基化的dna的水解;而ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的dna的水解。

[別名] endodeoxyribonuclease

[酶反應] 限制性內切酶能**dna分子在一限定數目的專一部位上。它能識別外源dna並將其降解。

[單位定義] 在指明ph與37℃,在0.05ml反應混合物中,1小時消化1μg的λdna的酶量為1單位。

[性狀] 製品不含非專一的核酸水解酶(由10單位內切酶與1μg λdna,保溫16小時所得的凝膠電泳圖譜的穩定性表示)。

限制性核酸內切酶的命名;一般是以微生物屬名的第一個字母和種名的前兩個字母組成,第四個字母表示菌株(品系)。例如,從bacillus amylolique faciens h中提取的限制性內切酶稱為bam h,在同一品系細菌中得到的識別不同鹼基順序的幾種不同特異性的酶,可以編成不同的號,如hindii、hindiii,hpai、hpaii,mboi、mboi等。

限制性核酸內切酶分佈極廣,幾乎在所有細菌的屬、種中都發現至少一種限制性內切酶,多者在一屬中就有幾十種,例如在嗜血桿菌屬中(haemophilus)現已發現的就有22種。有的菌株含酶量極低,很難分離定性;然而在有的菌株中,酶含量極高.如e. coli的pmb4(ecori酶)和h.

aegyptius(hal iii酶)就是高產酶菌株。據報道從10g的h. aegyptius的細胞中,能分離提純出可消化l0gλ噬茵體dna的酶量。

到目前為止,細菌是限制性內切酶,尤其是特異性非常強的i類限制性內切酶的主要**。

限制性內切酶的分類和性質:根據酶的功能特性、大小及反應時所需的輔助因子,限制性內切酶可分為兩大類,即i類酶和ii酶。最早從大腸桿菌中發現的ecok、ecob就屬於i類酶。

其分子量較大;反應過程中除需mg2+外,還需要s-腺苷-l甲硫氨酸、atp;在dna分子上沒有特異性的酶解片斷,這是i、ii類酶之間最明顯的差異。因此,i類酶作為dna的分析工具價值不大。ii類酶有ecor i、bamh i、hind ii、hind iii等。

其分子量小於105道爾頓;反應只需mg2+;最重要的是在所識別的特定鹼基順序上有特異性的切點,因而dna分子經過ii類酶作用後,可產生特異性的酶解片斷,這些片斷可用凝膠電泳法進行分離、鑑別。相當一部分酶(如ecor i、bamh i、hind等)的切口,作用點有180°旋轉對稱性,因而可形成粘性末端,但也有一些ii類酶如a1u i、bsur i、bal i、hal iii、hpa i、**a i等切割dna分子並不產生粘性末端,而只形成平整末端。

在已發現的限制性內切酶中,近百種酶的識別順序已被測定。有很多**不同的酶有相同的鹼基識別順序,這種酶稱為「異源同功酶」(isochizomer,同切限制內切酶;同裂酶)。應該注意的是,這些酶雖然有相同的識別順序,但它們的切點並不完全一樣。

例如xma i和**a i都識別六核苷酸cccggg,但xma i的切點在cccggg,而ema i的切點則在cccgggg,前者切割dna分子,形成帶有ccgg粘性末端的dn**段,而後者並不形成粘性末端。當然,也有識別順序和切點都相同的酶,如hap ii、hpa ii、mno i,都在識別順序ccgg內有一相同的切點,hal iii和bsur i同樣在識別順序ggcc內有一相同的切點。

[用途] 用於dna基因組物理圖譜的組建;基因的定位和基因分離;dna分子鹼基序列分析;比較相關的dna分子和遺傳工程。

什麼是限制性內切酶?ii型限制性內切酶的結構特點及性質

限制性內切酶copy 一般指限制性核酸內切酶,限制性核酸內切酶是可以識別特定的核苷酸序列,並在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶,簡稱限制酶。根據限制酶的結構,輔因子的需求切位與作用方式,可將限制酶分為三種型別,分別是第一型 type i 第二型 type ii 及第三型 ...

下列有關基因工程中限制性核酸內切酶的描述,錯誤的是A

a 限制 酶具有專一性,能識別特點的核苷酸序列,並在特定的切點上切割,a正確 b 限制酶的活性受溫度的影響,b正確 c 限制酶能識別和切割dna,而不是rna,c錯誤 d 限制酶主要取自原核生物,d正確 故選 c 下列有關基因工程中限制性核酸內切酶的描述,錯誤的是 a 一種限制酶能識別某種特定的核糖...

基因工程中,是否常用一種限制性核酸內切酶切割目的基因和運載體

是的,這樣可以是得到的目的基因和運載體末端相同 但有時也用兩種不同的限制酶,是為了防止目的基因和運載體自己成環 下列有關基因工程操作的敘述正確的是 a 用同種限制性內切酶切割運載體與目的基因可獲得相同黏性 a 限制性內來切酶能夠源識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸bai序列,並且切du割形成特定zh...