什麼是噬菌體效價?如何測定,什麼是噬菌體效價?如何測定?

2021-05-23 02:29:19 字數 1412 閱讀 6716

1樓:海邊禾苗

噬菌體效價--------指噬菌體的濃度,即每毫升樣品含噬菌體的個數.通常是在含敏感菌的平板上形成噬菌斑進行噬菌體的計數,以每毫升中含有的噬菌斑形成單位(plaque forming unit/ml或pfu/ml)表示其效價.

例如,若每塊平皿加1 l稀釋106倍的樣品,可形成10個噬菌斑,則噬菌體效價為1010pfu/ml.(106*10*1000=1010;1ml=1000ml)

什麼是噬菌體效價,簡述雙層平板法的原理與主要操作

2樓:噠噠噠噠噠噠哪

噬菌體的分離純化及效價的測定

1 目的

1.1瞭解噬菌體效價的含義及其測定原理。

1.2學會檢查噬菌體的方法。

1.3掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。

2 原理

噬菌體是一類專性寄生於細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,

用常規微生物計數法無法測得其數量。

當烈性噬菌體侵染細菌後會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,

然後它們再擴散和侵染周圍細胞,

最終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變

清,或在含有敏感細菌的平板上出現肉眼可見的空斑──噬菌斑。

瞭解噬菌體的特性,

快速檢查、分離,並進行效價測定,對在生產和科研工作中防止噬菌體的汙染具有重要作用。

檢樣可以是發酵液、空氣、汙水、土壤等(至於無法取樣而需檢查的物件,可以用無菌

水浸溼的棉花塗拭表面作為檢查樣品)

。為了易於分離可先經增殖培養,使樣品中的噬菌體數量增加。

採用生物測定法進行噬菌體檢查,

約需12h

左右,因而不能及時判斷是否有噬菌體汙染。

通過快速檢查可大致確定是否有噬菌體汙染

,以採取必要的防治措施。

根據正常發酵

(培養)

液離心後菌體沉澱,

上清液蛋白含量很少,

加熱後仍然清亮;

而侵染有噬菌體的發酵

(培養)

液經離心後其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白,加熱後發生蛋白質變性,

因而在光線照射下出現丁達爾效應而不清亮

。此法簡單、

快速,對發酵液汙染噬菌體的判斷亦較準

確。但不適於溶源性細菌及溫合噬菌體的診斷,對侵染噬菌體較少的一級種子培養液

也往往不適用。

噬菌體的效價即1

ml樣品中所含侵染性噬菌體的粒子數。效價的測定一般採用雙層瓊脂平板法。

由於在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,

一般一個噬菌體產生一個噬菌斑,

故可根據一定體積的噬菌體培養液所出現的噬菌斑數,計算出噬菌體的效價。

此法所形成的噬菌

斑的形態、大小較一致,且清晰度高,故計數比較準確,因而被廣泛應用。

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