實時熒光定量PCR進行單拷貝檢測在理論和實驗上能做到嗎?如果可以,那大體的步驟是什麼?能否告知

2021-05-23 14:16:18 字數 1535 閱讀 5275

1樓:匿名使用者

實時熒bai光定量pcr一般用來檢

測基因的du表達量zhi變化情況,也可用來dao檢測插入的拷貝數。專

2樓:匿名使用者

理論上不行,實bai際上就更行du不通的。

pcr有最低檢出量,zhi一般要達

dao到皮克級。所以單拷專貝的量遠遠不能達到屬。

單拷貝(或者單細胞)pcr一般是通過數輪nested pcr來實現的。

你要設計什麼實驗?可以具體問我。

什麼是實時熒光定量pcr,檢測指標是什麼?

3樓:奔馬的香香豬

實時檢測pcr擴增,在擴增的指數期對起始模板進行定量,在擴增過程中,熒光訊號隨著pcr產物的增加而增強。我們實驗室使用的bioghsc super probe kit pcr實驗檢測dna,測得的迴圈數在28左右,整個pcr過程有4個階段,基線期---指數增長期---線性增長期---平臺期,指數增長期內,pcr有高度重複性,一般的檢測指標是看線性圖譜的擴增曲線的起跳值(ct值)。

4樓:錢塘書生

你要檢測什麼東西啊?

實時熒光定量pcr是檢測模板dna的拷貝數、基因表達量、基因突變等的

5樓:閱微基因

所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。參考資料:http:

實時熒光定量pcr的重複性好是什麼意思

6樓:為青生物

3個實驗重複的ct值的標準差在0.167以內(abi的標準),我們一般在0.5以內就可以了

實時熒光定量pcr的個體重複問題

7樓:匿名使用者

最好是不要,這樣會減小重複之間的誤差。特別是需定量的樣品,混樣對定量結果的準確性是有影響的

乙肝病毒hbv—dna定量 檢測方法,實時熒光定量pcr 結果7.82e+02 最低檢測下限5.00e+2 這是什麼意思??

8樓:匿名使用者

乙肝病毒dna的檢查,是檢查乙肝病毒在你體內的複製狀態的,7.82e+02是7.82乘以10的2次方,即782copy;相專應的最低檢測下限5.

00e+2是500copy,最屬低檢測下限是檢查的儀器能夠檢查出的最低的病毒複製的copy數,不能說病毒含量低於500就是陰性的,只能說儀器只能檢查到這個程度,而你的病毒含量782略高於最低檢測下限500,說明你體內的病毒複製是一個低水平的複製,傳染性較低。

9樓:匿名使用者

你的結果7.82e+02是7.82乘以10的2次方,即782;相應的最低檢測下限5.

00e+2是500,也就是說,病毒版含量低於權500是陰性的,而你的病毒含量782略高於最低檢測下限500,是弱陽性的。

StepOnePlus實時熒光定量PCR儀怎麼設定融解曲線

根據曲線初步判斷,整個實驗設計還可以!你做相對定量嗎,將樣品結果與對照看看基因表達量分析就可以了!如果絕對定量,需要進一步實驗吧!請問 實時熒光定量pcr怎樣設定才能有溶解曲線?有一種可能是,在試驗開始的設定階段,需要為整個實驗設計出熔解曲線的程式,這個您可能忘記了。在設定反應程式時,在最後加一步 ...

一般實時熒光定量pcr儀定檢週期是多少

這個要看你設定的迴圈數,一般就一個小時20分鐘左右,僅供參考 實時熒光定量pcr與普通pcr的區別是什麼?結果有何異同?能說明的問題是什麼?二者結果相同。都能說明生物體外的特殊dna複製的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。區別 1 二者系統組成不同 熒光定量pcr儀比普通的pcr儀多了熒光訊號採集系...

熒光實時定量pcr要購買哪些試劑和材料

如果你想做熒光抄定量pcr的根據襲實驗思路來說應該需要一下試劑和儀器 1.模板提取 一般為rna trizol 氯仿 異丙醇 無水乙醇 depc處理水 2.模板濃度測定 分光光度計或nanodrop 3.逆轉錄 逆轉錄試劑盒 或者一步法試劑盒 這一步可以用普通pcr做,也可以用水域做。4.熒光定量p...