測定微生物的生長曲線有幾種方法?要配置怎麼的培養基求詳解謝謝

2021-04-20 00:21:29 字數 3423 閱讀 3216

1樓:匿名使用者

首先回答你的第二

抄個問題——襲配製怎樣的培養基。這具體要看你培養什麼菌種而定。很多微生物有自己的特定培養基,或最適培養基。譬如大腸桿菌可以用lb或tb,酵母可以用ypd,細菌可以用營養肉湯等。

至於生長曲線的測定,一般是用如下方法:取菌種接種到對應培養基中(500ml三角瓶裝100ml培養基),合適的溫度和轉速培養。每隔一定時間取樣檢測od值。

每種微生物的生長曲線雖說都是經歷四個階段,趨勢一樣,但是其各個階段所處的時間長短是不一樣的,所以,在取樣時間上應該根據菌種的生長特性來調整。

常用測定微生物生長量的方法有幾種

2樓:騎秀逸閉豔

v常用測定微生物生長的方法有:1)稱乾重法。可用離心法或過濾法測定。

優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌。

2)比濁法。原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定。

優點:比較準確。3)測含氮量,大多數微生物的含氮量佔乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.

25即可測得其粗蛋白的含量。4)血球計數板法。優點:

簡便、快速、直觀。缺點:結果包括死菌和活菌。

5)液體稀釋法。對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查mpn表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量。優點:

可計算活菌數,較準確。缺點:比較繁瑣。

6)平板菌落計數法。取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數。優點,可以獲得活菌的資訊。

缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響。

微生物生長曲線測定中遇到的問題

3樓:紅頂商人

平板計數====精確.

分光光度計====快速.

一般我們不叫"天然培養基"或"合成培養基".針對不同的微生物,所需要的培養基是完全不同的,你這種叫法,實在太籠統了,基本上沒什麼意義.

但很顯然,培養基不同,生長曲線必然不一樣.

道理很簡單,吃的東西都不一樣,生長速度當然不一樣啊!最容易吸收利用的培養基,當然速度最快.

4樓:浙大阿米巴

對於平板和od再補充一下。

平板測定的是活菌數,od測定的是全部菌體數,包括死亡的菌體。

這是兩者的根本區別。當然od比較方便也是對的。

5樓:匿名使用者

好象這個沒有可比性

平板記數你得到的是個實在數

而od值是個比較值

一般是用平板計數和od值聯用:即用平板計數後再測od值,定好換算基準後,用od去快速測後面未知的數量。

當然,你只用平板話費時費力。

如果要減小誤差的話兩個一起用。

lz話有偏差,如果你平板計數用美藍染色只能看見死菌,而不是活的。所以這個還要看情況辦事。

所謂的天然培養基,它的很多成分你不知道,量也不清楚啊,和合成培養基基本上沒可比性。

但如果在都能保證生長的條件下,生長曲線應該大體相同。 (不要把要培養的東西餓死)

1.測定微生物數量的方法有哪些?

6樓:麻煩不見了噶

細菌計數1.計數器測定法:

即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.

1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。

本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。

2、電子計數器計數法:

電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈衝,自動記錄在電子記錄裝置上。

該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。

3、活細胞計數法

常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。

使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入o.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(ttc);③本法限用於形成菌落的微生物。

廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。

4、比濁法

比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。

此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。

5、測定細胞重量法

此法分為溼重法和乾重法。溼重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。

此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。

6、測定細胞總氮量或總碳量

氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。

7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱ccu)

這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例單介紹其操作:,簡

(1)取12只無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。

(2)在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管

(3)於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.

一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用ccu法比較合適。

7樓:匿名使用者

1.顯微鏡直接觀察

2.平板計數

3.血球計數版計數

4.微生物特定成分分析

5.乾重法

6.比濁法

8樓:匿名使用者

活菌測量有血球計數板,此外還有細胞稱重法

微生物生長曲線 的原因???速求答案/!

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