什麼是標記基因和報告基因,報告基因和標記基因的區別是什麼?

2021-04-20 20:49:21 字數 2584 閱讀 6733

1樓:閆舒雲祈馨

什麼是標記基copy

因和報告基因

標記基因通常用來檢驗重組dna載體轉化成功與否,或者檢測目的基因在植物細胞或組織中的定位。常用的標記基因是一些抗生素抗性基因,如卡那黴素抗性基因、潮黴素標記基因等。

如:某種具有氨苄抗性基因質粒(該基因即可認為標記基因),與外源dn**段組合形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有氨苄抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因。當用選擇培養基(比如含有氨苄的培養基),來培養受體細胞時,能夠在培養基中存活下來的受體細胞就可以認為是成功的匯入了外源dna,標記基因就起作用了。

作為報告基因,在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件:(1)已被克隆和全序列已測定;(2)表達產物在受體細胞中不存在,即無背景,在被轉染的細胞中無相似的內源性表達產物;(3)其表達產物能進行定量測定。目前常用的報告基因有氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、熒光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型鹼性磷酸酶基因(seap)、綠色熒光蛋白基因(gfp)等。

載體構建中常用的選擇標記基因和報告基因是什麼?

載體構建中常用的選擇標記基因和報告基因是什麼?

2樓:中國農業出版社

植物外植抄體經致瘤土壤桿菌介導法襲或其他方法轉化後,實際上只有少數細胞被轉化,大部分細胞並沒有被轉化,這就需要用方便的方法將兩者區分開來,以便淘汰未轉化的細胞,選擇轉化的細胞,進而使轉化的細胞再生成為可育的轉基因植株。目前多用特定的選擇標記基因或報告基因。植物基因轉化載體系統中均含有一個或多個標記基因,用於選擇和篩選。

標記基因編碼一種不存在於正常植物細胞中的酶,較小,可用於嵌合基因構建,可在轉化體中得到充分表達,易於檢測,並可定量分析。

報告基因和標記基因的區別是什麼?

3樓:科學啟蒙生物

標記基因包括報告基因,報告基因屬於標記基因中的一種。

4樓:糟油酒丸

據我瞭解的bai一個重要區別是報告基du因的zhi表達水平必須能

夠對某dao種條件作出不同版反應,才能夠給出權此種引數是陰性是陽性是增加還是減少的答案。而標記基因只要持續穩定地表達,使得帶有它的細胞被標記為此基因陽性即可。

使用報告基因時,往往也需要標記基因,否則無法有效地區分真正的陰性與未成功轉染細胞所呈現的假陰性。

報告基因和標記基因的區別是什麼

5樓:o綠色背影

標記基因通常用來檢驗重組dna載體轉化成功與否,或者檢測目的基因在植物細胞或組織中的定位。常用的標記基因是一些抗生素抗性基因,如卡那黴素抗性基因、潮黴素標記基因等。

如:某種具有氨苄抗性基因質粒(該基因即可認為標記基因),與外源dn**段組合形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有氨苄抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因。當用選擇培養基(比如含有氨苄的培養基),來培養受體細胞時,能夠在培養基中存活下來的受體細胞就可以認為是成功的匯入了外源dna,標記基因就起作用了。

作為報告基因,在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件:(1)已被克隆和全序列已測定;(2)表達產物在受體細胞中不存在,即無背景,在被轉染的細胞中無相似的內源性表達產物;(3)其表達產物能進行定量測定。目前常用的報告基因有氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、熒光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型鹼性磷酸酶基因(seap)、綠色熒光蛋白基因(gfp)等。

如:綠色熒光蛋白(gfp)基因。綠色熒光蛋白**于海洋生物水母,其基因可在異源組織中表達併產生光,gfp

cdnad開放閱讀框架長度約740bp,編碼238個氨基酸殘基,其肽鏈內部第65-67位絲氨酸-脫氫酪氨酸-甘氨酸通過自身環化和氧化形成一個髮色基因,在長紫外波長或藍光照射下發出綠色熒光。轉染後的細胞可在熒光顯微鏡或流式細胞儀(facs)中直接觀察基因的表達。

質粒圖譜怎麼看

6樓:匿名使用者

第一步:首先看ori的位置,瞭解質粒的型別(原核/真核/穿梭質粒)

ori的箭頭指複製方向,其他元件標註的箭頭多指轉錄方向(正向)。

第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什麼篩選標記:

(1)ampr:水解β-內醯胺環,解除氨苄的毒性。

(2)tetr :可以阻止四環素進入細胞。

(3)camr:生成氯黴素羥乙醯基衍生物,使之失去毒性。

(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉移酶,使g418(卡那黴素衍生物)失活。

(5)hygr:使潮黴素β失活。

第三步:看多克隆位點(mcs)。它具有多個限制酶的單一切點,便於外源基因的插入。

如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標誌基因的失活,而便於篩選。決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

第四步:再看外源dna插入片段大小。質粒一般只能容納小於10kb的外源dn**段。一般來說,外源dn**段越長,越難插入,越不穩定,轉化效率越低。

第五步:是否含有表達系統元件,即啟動子-核糖體結合位點-克隆位點-轉錄終止訊號。這是用來區別克隆載體與表達載體。

克隆載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用那種載體,還是要以實驗目的為準繩。

報告基因和標記基因的區別是什麼

標記基因通常用來檢驗重組dna載體轉化成功與否,或者檢測目的基因在植物細胞或組織中的定位。常用的標記基因是一些抗生素抗性基因,如卡那黴素抗性基因 潮黴素標記基因等。如 某種具有氨苄抗性基因質粒 該基因即可認為標記基因 與外源dn 段組合形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有氨苄...

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