應用醋酸纖維素薄膜電泳鑑定分離純化根據什麼來確定它是清蛋白還

2021-08-17 14:18:25 字數 5081 閱讀 2803

1樓:

一、原理

醋酸纖維薄膜電泳是用醋酸纖維素薄膜作為支援物的電泳方法。帶電顆粒在電場力作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。由於各種蛋白質都有特定的等電點,如將蛋白質置於ph值低於其等電點的溶液中,則蛋白質將帶正電荷而向負極移動。

反之,則向正極移動。因為蛋白質分子在電場中移動的速度與其帶電量、分子的形狀及大小有關,所以,可用電泳法將不同的蛋白質分離開來。血清中含有多種蛋白質,它們的等電點都在ph 7.

5以下。將血清放於ph 8.6的緩衝液電泳時,所有的血清蛋白都帶有負電荷,在電場中將向正極移動。

由於各種血清蛋白在相同ph時所帶電荷數量不等,分子顆粒大小不一,因而泳動速度不同,經電泳被分離開來。

本實驗以醋酸纖維素薄膜(簡稱cam)為支援物分離血清中的不同蛋白質。它是一種良好的呈均一泡沫狀疏鬆薄膜,厚約120μm具有一定的吸水性。

二、實驗材料、儀器及試劑

1.材料:健康人血清或雞血清

2.儀器:電泳儀 電泳槽

3.試劑:

(1)醋酸纖維素薄膜;

(2)ph8.6 巴比妥緩衝液(離子強度0.06~0.07):取巴比妥0.83克,巴比妥鈉6.38克,加蒸餾水加熱溶解後,定容至500ml。

(3)染色液:取氨基黑10 b 0.5克,溶於50ml甲醇中,再加冰醋酸10ml,蒸餾水40ml混勻。

(4)漂洗液:95%乙醇4.5ml,冰醋酸 5ml,蒸餾水50ml混合。

(5)透明液:95%乙醇80ml,冰醋酸20ml混合。

三、實驗方法

1.準備薄膜:將切割整齊的 2.5×6cm的薄膜條,浸入巴比妥緩衝液中浸透後,取出,用吸水紙吸去多餘緩衝液。

2.點樣:仔細辯認薄膜的粗糙面與光滑面,在粗糙面距離薄膜一端1.5cm處,用鉛筆輕輕劃一條直線。

用玻棒蘸上血清樣品,塗於蓋玻片邊緣處(邊緣長度應比膜條寬度窄),將此邊緣按壓在直線上。注意:樣品應點在薄膜的粗糙面一側。

待血清完全滲入薄膜後,將膜面翻轉,點樣面(粗糙面)朝下,置電泳槽中,薄膜點樣端放於負極一側。

3.電泳:開啟電源,調節電壓 110~130v,電流0.4~0.6m a/cm寬,電泳時間45~60分鐘,電泳完畢後,關閉電源。

4.染色漂洗:將薄膜從電泳槽中取出,直接浸入染色液中約5分鐘,再轉入漂洗液中反覆浸洗3~4次,直至背景顏色脫淨為止。此時,正常血清蛋白在薄膜上顯示出五條區帶。

從前端至點樣處的方向分別為清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白。

5.定量測定:時可將膜條用濾紙壓平吸乾,按區帶分段剪開,分別浸在體積 0.4mol/l氫氧化鈉溶液中,並剪取相同大小的無色帶膜條作空白對照,進行比色。

或者將乾燥的電泳圖譜膜條放入透明液中浸泡2~3分鐘後,取出貼於潔淨玻璃板上,乾燥後,即為透明薄膜圖譜,可用光密度計直接測定。

四、注意事項

1.點樣好壞是電泳圖譜是否清晰的關鍵,點樣量要適當。

2.漂洗時應多漂洗幾次,直至無蛋白區底色脫淨為止。

2樓:緋妤

蛋白質用醋酸纖維素薄膜電泳可分為五個區帶,γ-球蛋白的等電點約為7.3,在ph8.6的巴比妥緩衝液中,帶的負電荷最少,因此在電場中比其它蛋白質移動速度慢。

而清蛋白等其它蛋白質的等電點均小於7.3(pl分別為4.9、5.

06和5.12),因此在電場中比γ-球蛋白移動速度快,其中清蛋白等電點為4.88帶負電荷最多,速度最快,且清蛋白在血清中含量最多。

所以最接近點樣線的是γ-球蛋白,最遠離點樣線的最粗的線是清蛋白。

【沒有查到答案就只能自己整理了,順便來造福一下人類】

3樓:御劍遊仙劍

根據它的遷移率,查表就能對比出來。這個的前提是你實驗過程沒有太大誤差

大學理工類都有什麼專業 10

4樓:house蜜糖棗棗

理工類專業:

數學與應用數學、資訊與計算科學、

物理學、應用化學、生物技術、 地質學、 大氣科學類、理論與應用力學、電子資訊科學與技術、環境科學、採礦工程、石油工程、冶金工程、機械設計製造及其自動化、建築學等。

1、建築學專業

建築學是一門以學習如何設計建築為主,同時學習相關基礎技術課程的學科。主要學習的內容是通過對一塊空白場地的分析,同時依據其建築對房間功能的要求,建築的型別,建築建造所用的技術及材料等,對建築物從平面,外觀立面及其內外部空間進行從無到有的設計。

2、石油工程專業

石油工程專業培養具備工程基礎理論和石油工程專業知識,能在石油工程領域從事油氣鑽井工程、採油工程、油藏工程、儲層評價等方面的工程設計、工程施工與管理、應用研究與科技開發等方面工作,獲得石油工程師基本訓練的高階專門技術人才。

3、環境科學專業

環境科學專業培養具備環境科學的基本理論、基本知識和基本技能。該專業學生主要學習環境科學方面的基本理論、基本知識,受到應用基礎研究、應用研究和環境管理的基本訓練,具有較好的科學素養及一定的教學、研究、開發和管理能力,掌握環境監測與環境質量評價的方法以及進行環境規劃與管理的基本技能。

4、資訊與計算科學專業

資訊與計算科學專業原名」計算數學」,2023年更名為「計算數學及其應用軟體」,2023年教育部將其更名為「資訊與計算科學」,是以資訊領域為背景,數學與資訊,計算機管理相結合的數學類專業。

5、物理學專業

物理學專業培養掌握物理學的基本理論與方法,具有良好的數學基礎和實驗技能,能在物理學或相關的科學技術領域中從事科研、教學、技術和相關的管理工作的高階專門人才。

5樓:boy我最靚

大學理工類有很多種專業,比如理學有物理,數學,化學生物等等。公學的科目二就更多了,比如電氣工程,汽車工程這類的工程都屬於工業工程,你可以在作業選擇上自己選擇。

6樓:匿名使用者

理工科專業分為理、工、農、醫四個學科門類,各學科

專業設定如下:

一、理學

1. 數學類 :數學與應用數學;資訊與計算科學

2. 物理學類:物理學;應用物理學

3.化學:化學;應用化學

4. 生物科學類:生物科學;生物技術

5.天文學類:天文學

6. 地質學類:地質學;地球化學

7. 地理科學類:地理科學;資源環境與城鄉規劃管理;地理資訊系統

8. 地球物理學類:地球物理學

9. 大氣科學類:大氣科學;應用氣象學

10. 海洋科學類:海洋科學;海洋技術. 海洋學

11. 力學類:理論與應用力學

12. 電子資訊科學類:電子資訊科學與技術;微電子學;光資訊科學與技術

13. 材料科學類:材料物理;材料化學

14. 環境科學類:環境科學;生態學

15. 心理學類:心理學;應用心理學. 心理諮詢

16. 統計學類:統計學. 電算化會計與統計、統計與會計等

二、工學

1. 地礦類:採礦工程;石油工程;礦物加工工程;勘查技術與工程;資源勘查工程.**地質勘察與管理

2. 材料類:冶金工程;金屬材料工程;無機非金屬材料工程;高分子材料與工程.化學裝潢材料及應用、寶石學

3. 機械類:機械設計製造及其自動化;材料成型及控制工程;工業設計;過程裝備與控制工程,化工裝置與機械、飛機及發動機維修

4.儀器儀表類:測控技術與儀器.自動化儀表及應用、醫用電子儀器、測繪儀器

5. 能源動力類:核工程與核技術. 熱能與動力工程、製冷低溫技術、採暖與通風

6. 電氣資訊類:電氣工程及其自動化;自動化;電子資訊工程;通訊工程;電腦科學與技術;. 軟體工程.

7. 土建類:建築學;城市規劃;土木工程;建築環境與裝置工程;給水排水工程. 景觀設計. 工程造價. 工程管理.

8. 水利類:水利水電工程;水文與水資源工程;港口航道與海岸工程

9. 測繪類:測繪工程. 測量工程、環境治理工程.

10. 環境與安全類:環境工程;安全工程. 室內環境控制工程

11. 化工與製藥類:化學工程與工藝;製藥工程. 精細化工

12. 交通運輸類:交通運輸;交通工程;車輛工程. 油氣儲運工程;航海工程;航海技術;輪機工程. 鐵道運輸

13. 海洋工程類:船舶與海洋工程

14. 輕工紡織食品類:食品科學與工程;輕化工程;包裝工程;印刷工程;紡織工程;服裝設計與工程

15. 航空航天類:飛行器設計與工程;飛行器動力工程;飛行器製造工程;飛行器環境與生命保障工程. 航天測控工程、空間工程

16.**類:**系統與發射工程;探測制導與控制技術;彈藥工程與**技術;特種能源工程與煙火技術;地面**機動工程;資訊對抗技術. 、軍械儲存與管理

17. 工程力學類:工程力學. 工程結構分析

18. 生物工程類:生物工程.生物醫學工程

19. 農業工程類:農業機械化及其自動化;農業電氣化與自動化;農業建築環境與能源工程;農業水利工程

20. 林業工程類:森林工程;木材科學與工程;林產化工.

21. 公安技術類:刑事科學技術;消防工程. 刑偵技術等

22、公安學類 (包括偵查學、刑事偵察、經濟犯罪偵察等)

23. 實用技術類 (包括計算機網路工程與管理、建築裝飾設計與工程、資訊與多**技術等)

三、農學

1. 植物生產類:農學;園藝;植物保護;茶學,花卉、種植養殖

2. 草業科學類:草業科學,商品花卉、園林花卉技術、種子種苗等

3. 森林資源類:林學;森林資源保護與遊憩;野生動物與自然保護區管理

4. 環境生態類:園林;水土保持與荒漠化防治;農業資源與環境,風景園林、環境保護等

5. 動物生產類:動物科學:蠶學,動物科學、經濟動物、養殖技術等

6. 動物醫學類:動物醫學;包括動物衛生檢驗、畜牧獸醫、動植物檢疫等

7. 水產類:水產養殖學;海洋漁業科學與技術,名特水產養殖、資源與漁政管理等

8、農業經濟管理類 (包括農業經濟管理、林業經濟管理、鄉鎮建設與管理)

四、醫學

1. 基礎醫學類:基礎醫學

2. 預防醫學類:預防醫學, 衛生檢驗、婦幼衛生等

3. 臨床醫學與醫學技術類:臨床醫學;麻醉學;醫學影像學;美容醫學、醫學檢驗、高階助產等

4. 口腔醫學類:口腔醫學, 口腔修復工藝學

5. 中醫學類:中醫學;鍼灸推拿學;蒙醫學;藏醫學

6. 法醫學類:法醫學

7. 護理學類:護理學, 高階護理、中西藥結合護理

8. 藥學類:藥學;中藥學;藥物製劑

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