兩種氨基酸的混合液,其等電點分別為3 0和9 0,如何採用電泳的方法分離這兩種氨基酸

2022-10-10 10:05:09 字數 3447 閱讀 4783

1樓:山鷹

ph設定為7就可以,點樣孔做在膠的中間,兩種氨基酸會帶上正電和負電,會向相反方向移動,最後就能分離出來了。

另外,當膠和緩衝液中的ph=7.0時,等點電3.0會向正極移動;而等電點9.0的氨基酸是向負極移動的。

2樓:***

溶液的ph應該在兩個等電點中間,比如是6。這樣兩個氨基酸帶不同電荷,分別向兩極移動,容易分開。其實用3或者9,甚至稍微超出一些,也是可以分開的。

關於氨基酸的電泳

3樓:零下七度

氨基酸分子中的氨基是鹼性的,而羧基則是酸性的。但它們的酸鹼解離常數比一般的羧基-cooh和氨基-nh₂低。

在電場中的電泳與氨基酸所帶的電荷有關,phpi時,帶負電向正極移動。

也就是說在ph=7下,酸性氨基酸顯酸性,帶負電,電泳向正極移動;鹼性氨基酸顯鹼性帶正電,電泳向負極移動。

氨基酸的合成

必需氨基酸一般由碳水化合物代謝的中間物,經多步反應(6步以上)而進行生物合成的,非必需氨基酸的合成所需的酶約14種,而必需氨基酸的合成則需要更多的,約有60種酶參與。

生物合成的氨基酸除作為蛋白質的合成原料外,還用於生物鹼、木質素等的合成。另一方面,氨基酸在生物體內由於氨基轉移或氧化等生成酮酸而被分解,或由於脫羧轉變成胺後被分解。

4樓:

1.基礎知識(若學過氨基酸的酸鹼性,可直接pass)

氨基酸分子中的氨基是鹼性的,而羧基則是酸性的。但它們的酸鹼解離常數比一般的羧基-cooh和氨基-nh2低。

例如:甘氨酸:ka=1.6×10-10,kb=2.5×10-12

大多數的羧酸:ka=10-5

這說明氨基酸在一般情況下不是以遊離態的羧基和氨基存在的,而是以內鹽的形式存在(內鹽:偶極離子),h3n+ _chrcoo - 。

可以把測得氨基酸的ka值看成是氨基酸中銨離子的酸度:ka~nh3+

把測得氨基酸的kb值看成是氨基酸中羧酸根離子的鹼度:kb~coo-

氨基酸即帶有氨基,又帶有羧基,所以是兩性化合物,既能和酸反應,也能和鹼反應。在強酸性溶液中,以正離子形式存在,在強鹼性溶液中以負離子形式存在。

若能水解的氨基個數少於能水解的羧基個數(溶液呈酸性),則為酸性氨基酸,包括:天冬氨酸,穀氨酸,天冬醯胺,谷氨醯胺四種;若能水解的氨基個數多於能水解的羧基個數(溶液呈鹼性),則為鹼性氨基酸,包括:賴氨酸,精氨酸,組氨酸,脯氨酸四種。

2.氨基酸的電泳

當氨基酸的溶液置於電場中時,所發生的變化取決於溶液的酸鹼度。

在相當鹼性的溶液中,陰離子ⅱ超過陽離子ⅲ,因此氨基酸向陽極遷移;在相當酸性的溶液中,陽離子ⅲ是過量的,因此,氨基酸向陰極遷移,如果ⅱ和ⅲ完全相等,那麼,沒有淨遷移。在這樣的條件下,任何一個分子作為正離子和作為負離子存在的機會是完全相等的,向一個電極方向的任何微小移動,馬上就被一個相等的朝另一個電極的方向移動所抵消。當一個特定的氨基酸在電場的影響下不發生遷移時,這個氨基酸所在溶液的氫離子濃度叫做氨基酸的等電點,通常pi表示。

淨電荷為零的氨基酸所在的溶液的ph值為pi。

在等電點時,氨基酸的溶解度最小,因而用調節等電點的方法可以從氨基酸的混合物中分離出某些氨基酸。

中性氨基酸pi =5.5~6.3 ,酸性氨基酸pi =2.

8~3.2  ,鹼性氨基酸pi =7.6~10.

6。一般來說,氨基酸含氨基,pi值較高,含羧基多者ph值較低 。當氨基酸中氨基多於一個時,當淨電荷為零時,氨基酸溶液鹼性強於氨基與羧基相等的溶液的ph值,故溶液ph值較高,pi值高。

同理,氨基酸羧基多時,pi值較值小。

這一部分是比較難理解,不清楚的地方還可以再問我。

5樓:

1、氨基酸的酸鹼性是根據側鏈基團的酸鹼性質來劃分的;側鏈基團含有酸性基團的稱為酸性氨基酸,有天冬氨酸,穀氨酸,天冬醯胺,谷氨醯胺四種;鹼性氨基酸側鏈含有鹼性基團,有賴氨酸,精氨酸二種。

2、酸性氨基酸的等電點(pi)小於7,在phpi時,帶負電,顯鹼性。

鹼性氨基酸的等電點(pi)大於7,同樣在phpi時,帶負電,顯酸性。

3、在電場中的電泳與氨基酸所帶的電荷有關,phpi時,帶負電向正極移動。

也就是說在ph=7下,酸性氨基酸顯酸性,帶負電,電泳向正極移動;鹼性氨基酸顯鹼性帶正電,電泳向負極移動。

6樓:酥糖的糖

一個氨基酸的基本結構是至少1-nh2 ,1-cooh1-nh2,2-cooh 的就是酸性氨基酸,帶正電2-nh2, 1-cooh 的就是鹼性氨基酸,帶負電酸性氨基酸有asp glu

鹼性氨基酸有lys arg (有的地方算上his)出題的話,一般是計算等電點,給出一個氨基酸的pk1,pk2,pk3酸性氨基酸:(pk1+pk2)÷2

鹼性氨基酸:(pk2+pk3)÷2

7樓:徐家傲

dna電泳懂麼? 原理一樣的。只不過通常氨基酸電泳是2d electrophoresis,按mass 和isoeletric point來分。

酸性或鹼性視乎amino acid的r基團。

搞本生化的教課書看看吧,很基本的

8樓:

我汗顏·····

為了200分,他們連老命都不要了···

9樓:匿名使用者

有可能的話看一下大學生物化學,字太多了不想打,呵呵。。。

10樓:本羅綺

我高中時也搞過生物競賽。你這個問題我是到了大學才學的,建議你看一下生物化學的書,上面都有講解的。

11樓:

電泳是空間勻強電場作用下,分散粒子在流體中發生移動的現象。由於各物質的遷移速率有差別,故電泳是分離物質的常用方法。它又可分為:

移動介面電泳是不含支援物的電泳。溶質在自由溶液中泳動,故也稱自由電泳,適用於高分子的檢測,但不易完全分離。

區帶電泳是含有支援物的電泳,支援物上混合樣品被置於狹小的區帶中泳動,分離出彼此分離的區帶。支援物有很多種,由此又衍生出區帶電泳的不同分支,例如聚丙烯醯胺凝膠電泳、紙電泳、等電聚焦電泳、等速電泳、薄層電泳等。

電泳法分離混合蛋白質的基本原理是什麼

等電點分別是4.9和6.8的兩種不同蛋白質混合液,在哪種ph條件下電泳分離效果最好?

12樓:匿名使用者

當然是c,ph小於pi帶正電向負極移動,反之向正極,這樣就分開了

如何應用離子交換層析分離氨基酸混合物

13樓:愛你一萬年

離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹.高聚物分子由能電離的極性基團及非極性的樹脂組成.極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變.

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