1樓：為水情狂
基因表達載體的構建 是將目的基因與運載體結合的過程
基因表達載體的構建方法有幾種
2樓：匿名使用者
你好，具體的看看這個吧
希望有所幫助
3樓：匿名使用者
現在很多生物公司可以提供載體構建服務的，例如中美泰和生物技術公司
如何構建一個基因的過表達載體
4樓：風翼殘念
當拿到一個基因的dn**段後，就需要把它匯入一個載體，一方面長期儲存。另一方面也需要以載體為媒介將基因匯入受體細胞中。基因表達載體的構建是基因工程的核心。
常用的載體有細菌質粒，噬菌體和動植物病毒。其中質粒載體最常用。所謂載就是一個很長的環狀dna，攜帶一些基因，可以匯入細菌中自我複製，也可以從細菌中提取出來改造。
現在我們就需要把sun片段連到一個載體，用vectornti開啟，研究一下用哪個酶處理，這個載體需要用**a1這個酶切開，然後用sun連上，替換切下來的ccdb，這裡要用到兩個酶，一個**a1限制性內切酶切開，一個dna連線酶把新片段連上，植物轉基因載體和這些酶都是非常常用的試劑。
載體構建好之後需要把它們匯入大腸桿菌中複製，這裡就要用到大腸桿菌的感受態了，十把構建好的載體和感受態混合，然後放到42度熱水處理個1分鐘，再冰上放個3分鐘。
這時需要一些培養細菌的培養基來培養菌們，大腸桿菌這種菌很好養活，唯一需要注意的是，滅菌過後的培養基要小心儲存。把在冰上處理過的大腸桿菌放到培養基中培養一天，為了防止沒有轉入載體的菌也混進來，我們在載體上加入了一個抵抗抗生素的基因。
這樣我們在培養基中加入這種抗生素，在裡面就只有需要的大腸桿菌能生長了。最後得到了上億個攜帶著含有我們的sun基因的載體的大腸桿菌，這時就需要把質粒再提出來。
實驗室裡提質粒需要用專門的試劑盒，也可以簡化一下，先把菌液離心讓菌沉澱，然後再用水把菌打散，然後煮沸1分鐘再離心，取上清，上清中加乙醇讓dna析出，再離心讓dna沉澱，最後用水把dna溶解。這樣提出來的dna會有很多雜質以及細菌的基因組dna。
5樓：匿名使用者
用限制酶分別切割目的基因兩側及運載體，然後在dna連線酶的作用下就形成了基因表達載體。
6樓：紫耀星之軌跡
首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。然後用同
一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量dna連線酶，催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來，形成一個重組dna分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒dna分子結合，形成重組dna分子（也叫重組質粒）的。
怎樣構建目的基因表達載體
7樓：句月聽風
先看錶達載體有哪些合適的酶切位點，比如ndei,ncoi這樣識別序列有atg起始密碼子的，再看看目的基因含不含有這些位點，含有就不好連線了，挑好位點，計算下讀碼框是否正確，保證核糖體結合位點後的第一個atg與目的基因是間隔3的倍數個鹼基。下游的位點更好選，如果有6xhis標籤，想融合表達的話，就注意下要是同一讀碼框，同時利用載體的終止密碼子，如果沒有這樣的需要，就利用目的基因本身的終止密碼子好了。基本是這樣，具體還是看看書吧。
下列關於基因表達載體的構建描述錯誤的是（ ）a．基因表達載體的構建是基因工程的核心b．基因表達載體
8樓：幻世萌
a、基因表達載體使目的基因在受體細胞中穩定存在並且可以遺傳給下一代並表達和發揮作用，是基因工程的核心，a正確；
b、基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因，b正確；
c、目的基因主要指編碼蛋白質的結構基因，也可以是一些具有調控作用的因子，c正確；
d、由於受體細胞有植物、動物以及微生物之分，以及目的基因匯入受體細胞的方法不同，因此基因表達載體的構建是不完全相同的，d錯誤．
故選：d．
構建基因表達載體需要哪些工具
9樓：匿名使用者
大致需要以下幾種東西：（1）原始表達載體，用以把目的基因連上去；（2）擴增目的基因的模板；（3）核酸內切酶，用於切割載體和目的基因；（4）連線酶，用於連線目的基因和載體；（5）大腸桿菌感受態，用於轉化篩選陽性克隆。
10樓：佛樹花江燕
在構建基因表達載體時要用到的工具酶有限制酶和dna連線酶。
基因表達載體的構建（即目的基因與運載體結合）是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在，並且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用。
過程：首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。然後用同
一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量dna連線酶，催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來，形成一個重組dna分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒dna分子結合，形成重組dna分子（也叫重組質粒）的。
古代用來形容團結一致的句子有，表達「團結一致」的詩句有哪些？
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求詳細的基因表達載體的組成，要詳細啊
完整的表達copy載體必須包括 1 複製子，bai在細菌中擴增時所必須du。2 啟zhi動子，目的基因在細菌或細胞中dao轉錄所必須，轉錄了才能翻譯，是謂 表達 3 原核篩選標記，細菌增菌所必須。4 真核篩選標記，如果是真核表達，就是必須的。5 多克隆位點，即酶切位點，插入目的片段的區域。6 其他所...
回答有關基因工程的問題 （1）構建基因工程表達載體時，用不同
1 用限制bai酶切割dna後，可du能產生黏性末端，也可zhi能產dao生平口末端 若要版在限制酶基因工權程中，往往採用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端，再用dna連線酶使其直接進行連線 2 rna聚合酶識別和結合的部位是啟動子 將目的基因匯入微生物細胞時，常用ca2 處理微生物細...