熒光顯微鏡和鐳射共聚焦顯微鏡的區別

2021-05-19 04:56:26 字數 2190 閱讀 4198

1樓:學雅思

一、原理不同

1、熒光顯微鏡:是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發出熒光, 然後在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。

2、鐳射共聚焦顯微鏡:在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝鐳射掃描裝置,使用紫外光或可見光激發熒光探針。

二、特點不同

1、熒光顯微鏡:用於研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分佈及定位等。 細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射後可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色後,經紫外線照射亦可發熒光。

2、鐳射共聚焦顯微鏡:利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖象,以及在亞細胞水平上觀察諸如ca2+、ph值、膜電位等生理訊號及細胞形態的變化。

三、用處不同

1、熒光顯微鏡:熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。

是利用一定波長的光激發標本發射熒光,通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本的熒光影象。

2、鐳射共聚焦顯微鏡:鐳射掃描共聚焦顯微技術已用於細胞形態定位、立體結構重組、動態變化過程等研究,並提供定量熒光測定、定量影象分析等實用研究手段,結合其他相關生物技術,在形態學、生理學、免疫學、遺傳學等分子細胞生物學領域  得到廣泛應用。

2樓:紫林星

一個高檔一個低檔而已,看個人需要

傳統熒光

顯微鏡使用熒光物質標誌細胞中的特定結構,不僅影象與背景的對比度增強,而且由於許多熒光顯微鏡的光源使用短波長的紫外光當所觀察的熒游標本稍厚時,傳統熒光顯微鏡一個難以克服的缺點就顯現出來:焦平面以外的熒光結構模糊、發虛。原因是大多數生物學標本是層次區別的重疊結構(如耳蝸基底膜。

其實是外毛細胞 、多種支援細胞 、神經纖維等組成的空間結構),,在普通光學顯微鏡下聚焦平面的變化, 會表現出不同的形態。假若熒游標記的結構在不同層次上都有分佈,且重疊在一起,反射熒光顯微鏡(epifluorescent microscope)不僅從焦平面上收集光量,而且來自焦平面上方或下方的散射熒光也被物鏡所接收,熒光顯微鏡的光學解析度就要大大降低 。

鐳射掃描共聚焦顯微鏡用鐳射作為光源,採用共軛聚焦原理和裝置,並利用計算機對所觀察的物件進行數字影象處理觀察、分析和輸出。 其特點是可以對樣品進行斷層掃描和成像,進行無損傷觀察和分析細胞的三維空間結構[3]。 同時,利用免疫熒游標記和離子熒游標記探針,該技術不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可以對活細胞的結構、分子、離子及生命活動進行實時動態觀察和檢測,在亞細胞水平上觀察諸如 ca2+,ph 值,膜電位等生理訊號及細胞形態的變化,成為形態學、分子細胞生物學、神經科學、藥理學、遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具[3] ,極大地豐富了人們對細胞生命現象的認識。

3樓:12345愛幫

鐳射共聚焦顯微鏡是採用鐳射作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上採用共軛聚焦原理和裝置,並利用計算機對所觀察的物件進行數字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統。主要系統包括鐳射光源、自動顯微鏡、掃描模組(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數字訊號處理器、計算機以及圖象輸出裝置(顯示器、彩色印表機)等。通過鐳射掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進行斷層掃描和成像。

因此,可以無損傷的觀察和分析細胞的三維空間結構。

同時,通過鐳射掃描共聚焦顯微鏡也是活細胞的動態觀察、多重免疫熒游標記和離子熒游標記觀察的有力工具.精確地對光譜的本質進行分析,區分發射光譜高度重疊的不同標記的訊號。

最重要的是,對於多色的熒光染色,它能徹底消除了熒光串色的影響,同時最大限度的減少了樣品熒光訊號的損失。這些都是一般光鏡所不能達到的。

倒置熒光顯微鏡與鐳射共聚焦顯微鏡有什麼區別

4樓:

鐳射共聚焦顯微鏡是採用鐳射作為光源,在傳版統光學顯微權鏡基礎上採用共軛聚焦原理和裝置,並利用計算機對所觀察的物件進行數字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統。主要系統包括鐳射光源、自動顯微鏡、掃描模組(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數字訊號處理器、計算機以及圖象輸出裝置(顯示器、彩色印表機)等。通過鐳射掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進行斷層掃描和成像。

因此,可以無損傷的觀察和分析細胞的三維空間結構。

同時,通過鐳射掃描共聚焦顯微鏡也是活細胞的動態觀察、多重免疫熒游標記和離子熒游標記觀察的有力工具.精確地對光譜的本質進行分析,區分發射光譜高度重疊的不同標記的訊號。

最重要的是,對於多色的熒光染色,它能徹底消除了熒光串色的影響,同時最大限度的減少了樣品熒光訊號的損失。這些都是一般光鏡所不能達到的。

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