1樓：溫柔_654蕎
原位雜交（in situ hybridization）將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交，稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是：
在細胞或組織結構保持不變的條件下，用標記的已知的rna核苷酸片段，按核酸雜交中鹼基配對原則，與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合（雜交），所形成的雜交體 (hybrids）經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進，其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，已 成為最有效的分子病理學技術，同時在分析低丰度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
fish是原位雜交技術大家族中的一員，因其所用探針被熒光物質標記（間接或直接）而得名，該方法在80年代末 被髮明，現已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。基本原理是熒游標記的核酸探針在變性後與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性；通過熒光顯微鏡觀察熒光訊號可在不改變被分析物件（即維持其原位）的前提下對靶核酸進行分析。dna熒游標記探針是其中最常用的一類核酸探針。
利用此探針可對組織、細胞或染色體中的dna進行染色體及基因水平 的分析。熒游標記探針不對環境構成汙染，靈敏度能得到保障，可進行多色觀察分析，因而可同時使用多個探針，縮 短因單個探針分開使用導致的週期過程和技術障礙。
原位雜交技術的原位雜交的基本原理
2樓：哈比
原位雜交技術的基本原理是利用
核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測dna或rna互補配對，結合成專一的核酸雜交分子，經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件：組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是：
在細胞或組織結構保持不變的條件下，用標記的已知的rna核苷酸片段，按核酸雜交中鹼基配對原則，與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交)，所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進，其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，已 成為最有效的分子病理學技術，同時在分析低丰度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
免疫組化和原位雜交的區別
3樓：匿名使用者
1、定義不同
免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原
抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及相對定量的研究，稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。
2、作用不同
免疫組化：標本，實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理切片和組織晶片）和冰凍切片，後者包括組織印片、細胞爬片和細胞塗片。
抗體，免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體，單克隆抗體是一個b淋巴細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物製備。多克隆抗體是將純化後的抗原直接免疫動物後，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個b淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。
常用染色方法，根據標記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標法，親和組織化學法，後者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利於微量抗原（抗體）在細胞或亞細胞水平的定位，其中生物素—抗生物素染色法最常用。
原位雜交：細胞特異性mrna轉錄的定位，可用於基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究；
感染組織中病毒dna/rna的檢測和定位，如eb病毒mrna、人類乳頭狀瘤病毒和鉅細胞病毒dna的檢測；
癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測；
基因在染色體上的定位；
檢測染色體的變化，如染色體數量異常和染色體易位等；
**間期細胞遺傳學的研究，如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些腫瘤的診斷和生物學劑量測定等。
3、意義不同
免疫組化：近年來，隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。在常規腫瘤病理診斷中，5%-10%的病例單靠h.
e.染色難以作出明確的形態學診斷。
尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑑別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化腫瘤的鑑別診斷時，準確率可達50%-75%。
原位雜交：原位雜交：在研究dna分子複製原理的基礎上發展起來的一種技術。
其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成dna-dna、dna-rna或 rna-rna 雙鍵分子的特點，
應用帶有標記的（有放射性同位素，如3h、35s、32p、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質）dna或rn**段作為核酸探針，與組織切片或細胞內待測核酸（rna或dna）片段進行雜交，然後可用放射自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mrna或dna 的存在並定位；
用原位雜交技術，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水平來**細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
4樓：淵源
免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術。
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。
關於原位雜交是怎麼基因定位的問題。
5樓：匿名使用者
可以對mrna進行定位,定性,定量,表達部位很明確,但是定量不精確.
原位核酸分子雜交技術簡稱原位雜交含義是什麼？
6樓：鷹的飛翔
通過組織化學或免疫組織化學方法在被檢測的核酸原位形成帶顏色的雜交訊號，在顯微鏡或電子顯微鏡下進行細胞內定位。
1.原位核酸分子雜交技術簡稱原位雜交是應用已知鹼基順序並帶有標記物的核酸探針與組織、細胞中待檢測的核酸按鹼基配對的原則進行特異性結合而形成雜交體，然後再應用與標記物相應的檢測系統。
2.這一技術為研究單一細胞中dna和編碼各種蛋白質、多肽的相應mrna的定位提供了手段，使從分子水平研究細胞內基因表達及有關基因調控提供了有效的工具。
3.為組織化學或免疫細胞化學中革命性的突破，原位雜交技術已應用於基礎研究如基因**，轉基因檢測，基因表達定位，核dna和rna的mrna的排列和運輸，複製和細胞的分類。
4.臨床研究應用在細胞遺傳學(cytoge***ics)，產前診斷(prenatal diagnosis)，腫瘤和傳染性疾病的診斷，生物學劑量測定(biological dosimetry)和病毒學的病原學診斷等。
5.隨著核酸探針的製備，標記方法和基本操作方法的不斷改進，新的技術不斷湧現，相信在不久的將來，原位雜交技術將會更廣泛的被應用於各個學科，並不斷為生命科學提供新的資料。
原位核酸分子雜交技術簡稱原位雜交(in situ hybridization，ish)含義是什麼
7樓：匿名使用者
免疫組化的結果應該用「鐳射共聚焦顯微鏡」而不是文中所說的「電子顯微鏡「。
核酸分子原位雜交中雜交液的基本成分
8樓：匿名使用者
原位雜交是在分子生物學領域應用極為廣泛的實驗技術之一，是在研究生物體發育過程中的一種極為重要的分子遺傳學的研究方法。其英文名為in situ hybridization,其中in situ為拉丁文，原義是"in its natural position". 字面的意思理解就是說在其原來的天然的位置處雜交。
原位雜交主要是基於以下這個主要原理：單鏈的dna或者rna只要他們的序列是互補的，即符合at，cg的鹼基配對原則，那麼這樣的兩條核酸鏈之間（dna-dna，dna-rna，rna-rna）就可以形成一個穩定的雜交複合體。這一原理對於檢測一個特異的mrna在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細胞裡具體表達位置非常有用。
該技術最早應用於60年代末期，由於核酸分子雜交的特異性高，並可精確定位，因此該技術已被廣泛應用，例如與細胞內rna進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分複雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對於那些細胞數量少且散在於其他組織中的細胞內dna或rna研究更為方便；同時由於原位雜交不需要從組織中提取核酸，對於組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，並可完整地保持組織與細胞的形態，更能準確地反映出組織細胞的相互關係及功能狀態。
核酸原位雜交可根據其檢測物而分為細胞內原位雜交和組織切片內原位雜交；根據其所用探針及所要檢測核酸的不同又可分為dna-dna, rna-dna, rna-rna雜交。但不論哪種雜交都必須經過組織細胞的固定，預雜交，雜交，衝等一系列洗步驟及放射自顯影或免疫酶法顯色以顯示雜交結果。
我們在這兒介紹的是整胚原位雜交，不同於一般的在載片上對細胞和組織切片進行探針雜交及檢測的原位雜交，而是對完整的斑馬魚胚胎進行探針雜交及檢測，從整體上把握探針的結合部位，然後對胚胎進行切片，以確定探針結合的具體位置。整胚原位雜交在斑馬魚分子生物學研究中是一種非常重要的實驗方法，原位雜交的探針可以是同位素的探針，用放射自顯影來檢測；也可以是非同位素的探針，通過熒光或酶法予以檢測。我們這兒所介紹的一種原位雜交的方法是通過後者，以地高辛標記探針，然後用酶聯抗體的方法進行檢測。
原位雜交（in situ hybridazation）
固定收集斑馬魚的胚胎，在holfretor水中培養，到達所需要的發育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃儲存，二十四小時後用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然後換成甲醇，在-20c 儲存，待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理，去除色素。或者使用苯鋶脲稀溶液培養，可阻斷色素的形成)
關於原位雜交是怎麼基因定位的問題
可以對mrna進行定位,定性,定量,表達部位很明確,但是定量不精確.高中生物生物學理工學科 20 那個人回答的挺好，一個人產生的精子是有2的23次方種可能，人體內不止一個細胞形成精子，但是每個細胞形成的精子只有兩種 而第二個圖，是講精子形成過程，是說這一個細胞 形成的精子只有4個，兩種。生物屬於理工...
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