1樓:渴侯涵菱
細菌汙染:主要有洋蔥霍爾伯德菌型汙染。
確定是非常珍貴的細胞 建議分別配置含10倍慶大黴素和兩性黴素溶液(g/a)的pbs和5倍慶大黴租氏素和兩性黴素溶液(g/a)的完全培養基各乙份。然後先用10倍雙抗的pbs洗滌細胞5-10次, 然後用5倍雙抗的完全培養洗滌細胞3次以上,再加上含雙倍的g/a溶液放培養箱培養,乙個小時後換液,持續4個小時後,再加上正常培養細胞所需的抗生素,過夜,到最終確定細胞沒有任何汙染物,因此時細胞受損過大,建議優化培養基方式(血清提高2%-5%)或者立即凍存衡滲細胞,乙個月後復甦。
真菌汙染:汙染的多是麴黴菌,白色念珠菌,酵母菌,黑黴菌,孢子菌,真菌主要以預防為主,防治為輔,已經汙染了,建議採用以下方法:
1. 細胞一旦汙染,很難挽救,即使使用制黴菌素或放線菌素d,也是傷敵八千自損一萬的辦法,可使用抗生素進行查殺,但是高濃度的抗黴菌素對細胞有毒性作用。
2. 把所有細胞從汙染的co2孵箱轉移,採用過氧乙酸擦洗孵箱(全部,尤其四個角)。並把過氧乙酸放置在孵箱內乙個小時,使其蒸汽瀰漫。待過氧乙酸的氣味消散後,再移入細胞;
3. 用新潔爾滅擦拭超淨臺和牆壁,確保不留死角,地面用新潔爾滅消毒液拖地。
4. 將環境徹底消毒,整個培養間高錳酸鉀或者乳酸燻蒸,孵箱內部包括托盤等全部用苯酚搽洗,封閉2天。
真菌汙染預防方法:
1),將細胞移出來,用微量硫酸銅溶液擦拭co2孵箱內,再咐型脊把水盤裡加適量硫酸銅或者酸氫二鈉高鹽液體防止黴菌。
2)孵箱應定期清潔,大約乙個月左右清潔一次,3)可在培養基里加兩性黴素或制黴菌素)或[放線菌素d或雙抗進行預防。
4)最主要的還是要培養良好的無菌觀念,實驗室儘量不要大聲說話,佩戴好口罩,手套,操作時應小心,避免培養基撒入培養箱以及生物安全櫃,這些撒入培養箱的培養基為細菌及真菌的繁殖提供了很好的條件。
2樓:帳號已登出
細胞汙染培養基搖菌可用,顫和桐細胞是生物體基本的結構和功能單位,已知除病毒之外的所有生物茄坦均由細胞所組成,但病毒生命活動也必須在細胞中才棚李能體現,一般來說,細菌等絕大部分微生物以及原生動物由乙個細胞組成,即單細胞生物,高等植物與高等動物則是多細胞生物。
3樓:tdtdtd的家
mem培養基。
是一種新增了營養物的最低必需培養基,僅含有12種必需氨基酸、l-谷氨醯胺和8種維生素,搏擾簡含糖量為1g/是一種最基礎、最常用的細胞培養基,主要應用於貼壁細胞的培養,在新增血清後,可用於培養多種單層生長的細胞,如成纖維細胞。修改配方後的a-mem則可廣泛應用於各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞培養。
dmem培養基。
氨基酸含量是mem的兩倍,維生素含量是mem的4倍,以及硝酸鐵、丙酮酸鈉和一些補充氨基酸。此外,dmem分為低糖型和高糖型,葡萄糖含量分別為1g/l和。(低糖適於依賴性貼壁細胞培養,特別適用於生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養;高糖更適合高密度懸浮細胞培養,也適用於附著性較李凳差,但又不希望它脫離原來生長點的轉殖培養,也可用於雜交瘤中骨髓瘤細胞和dna轉染的轉化細胞的培養。
imdm培養基。
用於淋巴細胞和雜交瘤細胞的生長。與dmem相比,新增了hepes和硒,硝酸鉀取代了硝酸鐵,並且含有更多的氨基酸、維生素和無機鹽。
ham 's f-12k培養基。
用於支援原代細胞的生長和分化。f-12k增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、鈣、鎂、腐胺和酚紅的含量。
dmem/f12培養基。
dmem和f12的1:1混合物,能夠在低血清條件下支援多種哺乳動物細胞的培養,在此培養基中成功培養的細胞包括:mdck、神經膠質細胞、成纖維細胞和人內皮細胞等。
mccoy』s 5a培養基。
廣泛用於多種原代細胞及細胞系的培養,如**於骨髓、**、脾臟、腎臟和肺等組織的哺乳動物原代細胞。
rpmi-1640培養基。
是在mccoy』5a的基礎上進行改良研發出的,最初用於人白血病細胞的懸浮培養,後來發現也適用於hela、mcf-7、pc12、外周血單核細胞(b/t淋巴細胞)和星形細胞的培養。rpmi 1640與其它培養基的區別是含有還原型谷胱甘肽和高濃度維生素。此外還含有含有mem、dmem中不含的生物素、維生素b12和對氨基苯。
l15培養基。
l-15培養基的配方中不含用於co2平衡環境的碳酸鹽緩衝系統, 而是用磷酸鹽、l-精氨酸、l-組氨酸和 l-半胱氨酸作為緩衝劑。用半乳糖和丙酮酸鈉代替葡萄糖以防止乳酸的形成。基褲可以在無co2培養箱中進行細胞培養,或者擰緊瓶蓋培養。
怎麼用液體培養基連續培養細菌
4樓:小du趣談時事
細菌在液體裡是不會生成菌落的,可以用光合作用培養細菌。
液體輪正耐培養通常靜止培養,如果怕細菌抱團生長也可以**培養。接種培養基配好後,應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高,一般為20%~50%,即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4~1∶1,不應低於20%,尤其是微氣培養,接種量更應高些,否則光合細菌在培養液中很清悶難佔絕對優勢,影響培養的最終產量和質量。
液體培養細菌注意事項:
如果培養的光合細菌是淡水種,菌種培養可用蒸餾水,生產培養可用消毒的自來水(或井水)配製。如果培養的光合細菌是海水種,則用天然海水配製培養基,注意在海水中加入磷元素臘春時,不能用磷酸氫2鉀,應用磷酸2氫鉀,不然會產生大量沉澱。<>
怎麼用培養皿培養細菌
5樓:andrew在上班
用培養皿培養細菌的方法為:
1、將培養皿清洗乾淨,用牛皮紙或紗布包裹後,於高壓滅菌器中121℃滅菌30分鐘後待用。
2、將樣品用無毀搭菌生理鹽水溶解,將稀釋液1ml注入培養皿中,倒入已經滅菌好的培養基,待凝固。
3、將培養皿置36℃生化培養箱中培養2-3天纖腔拿,觀察培養基中生長的菌落。
培養皿是一種用於微生物或細胞培養的實驗室器皿,由乙個平面圓盤狀的圓攜底和乙個蓋組成,一般用玻璃或塑料製成。培養皿材質基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用於植物材料、微生物培養和動物細胞的貼壁培養也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用於植物材料的培養。
黴菌計數用什麼培養基
黴菌計數可以選擇 孟加拉紅瓊脂培養基 高鹽察氏培養基 pda培養基 沙堡羅培養基等等。這些培養基既能夠非常好的支援一般黴菌的生長,也能夠抑制雜菌的生長,從而有利於真菌的菌落計數。化妝品黴菌和酵母菌的計數可以用什麼培養基?化妝品黴菌和酵母菌的計數可以用孟加拉紅 虎紅 培養基或者孟加拉紅瓊脂平板。化妝品...
培養全能幹細胞的培養基是什麼,為什麼
幹細胞無血清基礎培養基和幹細胞無血清營養新增物 胚胎幹細胞的培養基屬於什麼培養基 胚胎幹細胞培 養基的發展歷程為傳統培養基加血清 條件培養基 無血清培養基,最高階別的無血清培養基是效能最優的培養基,批次穩定 成分明確,主要廠家有hy stemcell,invitrogen,stemcell等 克隆人...
la培養基和lb培養基在培養上有什麼不同
1 成分的不同 la是lb培養基里加入了氨苄青黴素,所以la培養基比lb培養基多了一種氨苄青黴素原料。2 應用的物件不同 由於lb多了一種原料,其中氨苄青黴素的濃度根據的質粒是鬆弛型還是嚴謹型來加的。培養基供微生物 植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有水 氮源 無機鹽 碳源 生長因...